杨宏伟 陈晓隆 陆岩 卜立敏 刘哲丽

　　中国医科大学附属盛京医院 中国医科大学附属第一医院 110004

　　目的：细胞因子在糖尿病性视网膜病变(DR)的发生、发展中起重要作用。新近发现的结缔组织生长因子(CTGF)具促血管生成、调节内皮细胞、诱导细胞凋亡等作用。本研究利用RNA干扰技术沉默CTGF，检测糖尿病大鼠视网膜中CTGF、VEGF 和TGF-b2蛋白和基因的表达，细胞凋亡发生情况，分析三因子在糖尿病大鼠早期视网膜中的作用机制。

　　方法：STZ诱导糖尿病大鼠模型。所有大鼠分为对照组，糖尿病组和干预组。干预组为糖尿病16周时CTGFsiRNA玻璃体腔注射。视网膜铺片ADP酶和HE染色观察视网膜及其血管形态。RT-PCR，Western-Blot和免疫组化方法检测视网膜内CTGF、VEGF和TGF-b2的表达。TUNEL法检测视网膜内细胞凋亡。

　　结果：糖尿病16周以前，视网膜结构规则，血管走行良，与对照组无显著差异。到24周时，视网膜结构不规则，水肿，血管僵硬变窄。细胞凋亡表达于4周时开始增加。CTGF表达增强开始于糖尿病8周，早于VEGF和TGF-b2的12周，随着病程的延长，三因子的表达逐渐增强。CTGFsiRNA在干预组大鼠视网膜内造成了CTGF基因的沉默，干扰效率为54.46%，同时也使VEGF、TGF-b2表达明显减弱，细胞凋亡表达明显减少，统计学上差异显著(P<0.05)。在糖尿病早期大鼠视网膜内三因子之间，以及三种因子与细胞凋亡的表达之间呈明显的正相关性(P<0.05)。

　　结论：CTGF，VEGF和TGF-b2在糖尿病早期视网膜中共同作用促进视网膜病变的发生。CTGFsiRNA有可能为临床提供一个预防和治疗DR的新策略。