胡玉新 蓝育青 夏朝霞 卢彦 王梅

　　中山大学附属第二医院 510120

　　目的：观察OCE(Concentrated extracting liquid of optic central，视中枢提取液)对体外培养视网膜组织的形态学影响，并鉴定OCE的有效成分，鉴定不同可溶性因子及低浓度，旨在为胚胎全层视网膜移植提供有效的保护性方法。

　　方法：制备OCE，采用SDS-PAGE电泳对OCE进行分离，通过Western blotting对OCE成分进一步鉴定。选用健康成年家犬20只(40眼)，随机分成四组，即I组：正常视网膜组;II组：10%小牛血清1640培养液组;III组：可溶性因子培养组;IV组：低浓度(1.25%)OCE培养组，各组均培养一周后进行组织形态学观察。

　　结果：SDS-PAGE电泳图谱观察，在140kD、22.8kD和16.4kD处形成3条蛋白质特征带，Western blotting显示在OCE中有7s NGF、CNTF和bFGF的阳性表达。不同培养条件下，II组各层细胞间连接疏松，结构紊乱，出现裂解现象，大量细胞坏死，视细胞胞核固缩，胞膜不完整，胞质液化，外节呈絮状改变，线粒体空泡变，内质网扩张，胞质中有均质状物;IV组各层细胞连接紧密，其中内核层及外核层细胞数量明显增多，节细胞无明显坏死现象，核膜完整，线粒体丰富。III组细胞和细胞器形态结构介于II组和IV组之间。

　　结论：低浓度OCE有促进体外培养视网膜组织感光细胞增殖的保护作用，而且OCE中至少含有NGF、CNTF和FGF等成分。