摘要 目的:观察体外不同浓度的转化生长因子13,(transforminggrowth factor—p2,TGF—p2)对牛角膜内皮细胞(bovine cornealendothelial ceils,bCECs)的抑制作用,探讨其可能的分子 机制。 方法:培养新生小牛的角膜内皮细胞,将第3代内皮细胞转移至96孔培养板,实验分6组,每组设定4个复孑L。1,2组分别为只含有培养液不含细胞和TGF一13,的空白对照组,和只含细胞和培养液不含TGF一8,的阴性对照组,3~6组分别加入含0.1,1,10,100ng/L TGF一6 的培养液。作用24,48,72h后用MTI"检测法测定各孔吸光度 值。作用48h后,用流式细胞检测仪对各组细胞周期进行检测。RT—PCR法测定不同浓度的TGF—B,组p27Kipl基因的表达情况。 结果:TGF—p 浓度为0.1~lng/L,作用24—72h,能明显的使bCECs的吸光度发生改变,作用48h抑制效果最明显。0.1和1ng/L浓度组吸光度与阴性对照组相比有显著差异性,作用48h可使bCECs的G。/G,周期细胞所占比例与阴性组对比有显著差异,其p27Klp1表达较其他组明显增强。 结论:0.1~1ng/L TGF—B 作用48h对bCECs具有显著增殖抑制作用,其抑制作用可能是通过上调细胞周期蛋白p27来实现的。
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