黄琛 许永根 李颖 陈晓勇 张晶 魏炜 王薇

　　北京大学第三医院眼科，北京大学眼科中心 100083

　　目的：研究大鼠骨髓间充质干细胞(MScs)向视网膜色素上皮(RPE)细胞分化的潜能。

　　方法：体外分离培养2周龄Brown Norway大鼠的MScs和RPE细胞。免疫荧光和流式细胞仪检测MScs分子表面标记物，并观察MSCs向脂肪细胞和成骨细胞分化的潜能。采用Millicell系统RPE细胞共培养和不同比例的RPE培养上清两种方式，诱导第二代和第三代的MSCs向RPE方向分化。倒置显微镜、扫描电镜和透射电镜观察诱导细胞(MR细胞)形态。免疫荧光检测MR细胞中RPE分子标记物的表达以评估诱导效率。利用FITC标记的猪ROS，观察诱导MR细胞特异性吞噬的能力。

　　结果：体外分离培养的MSCs表达特异性表面分子标记物，并具有脂肪分化和成骨分化的潜能。上清组的诱导效率明显高于Millicell系统共培养组。在培养上清组，诱导的MR细胞胞浆中存在明显的色素颗粒，细胞表面出现大量微绒毛结构，并表达RPE特异性分子标记物角蛋白8和RPE65。MR细胞表现出与培养的RPE细胞相同的吞噬活性，能特异性吞噬ROS，并表达吞噬相关蛋白CD36、MerTK和整合素αVβ5。20%比例的上清组能有效诱导MSCs向RPE方向分化。

　　结论：在RPE培养上清的诱导下，MSCs可以在体外向RPE细胞方向分化。MSCs来源的RPE样细胞，为RPE移植提供了新的细胞来源，显示了其在RPE相关疾病临床治疗中的应用潜力。