在本研究中,我们发现VEGF mRNA表达量升高近2.7倍,而上清中的VEGF蛋白的含量升高仅有1.5倍。VEGF mRNA和蛋白的表达水平不一致,我们分析可能有以下几个原因:首先,VEGF mRNA水平和蛋白表达水平可能不同,VEGF的转录和翻译水平有可能是不一致的;其次,虽然VEGF是一种分泌型蛋白,但是由于上清液存在稀释的问题,VEGF溶解于培养液中,因此改变的比率可能会减少。因此,VEGF mRNA和蛋白的表达水平不一致,但是他们变化的趋势是一致的,并且变化的差异都具有统计学意义。
本研究发现,在高糖条件下,腺苷A2A受体激动剂可以刺激人RPE细胞VEGF mRNA和蛋白的表达,腺苷A2A受体拮抗剂可以抑制人RPE细胞VEGF mRNA和蛋白的表达。我们的研究明确了高糖条件下,腺苷A2A受体调控人RPE细胞VEGF的合成。我们的研究亦证明了腺苷在调控VEGF的表达上具有重要的作用,腺苷在调控新生血管的过程中具有重要的作用。高血糖是糖尿病并发症发生和发展的重要危险因素,高糖作用于牛RPE细胞,可以刺激VEGF mRNA和蛋白的表达[15],因此,高糖可能刺激VEGF的合成。我们的研究模拟了糖尿病的高糖环境,在此基础上研究腺苷A2A受体对人RPE细胞VEGF的调控,发现了在高糖条件下腺苷A2A受体调控VEGF的合成。由此可以推测,在DR的发生和发展的过程中,腺苷A2A受体和高糖可能协同作用,刺激VEGF的表达量增加,加速新生血管的形成。
通过本研究我们推测,腺苷A2A受体能刺激VEGF的生成,可能参与糖尿病性视网膜病变新生血管的形成。腺苷A2A受体也可能成为DR药物治疗研发的新的分子靶点,为DR的药物治疗开发奠定基础。
【参考文献】
[1] Robert N and Frank. Diabetic Retinopathy[J]. N Engl J Med,2004,350:48-58.
[2] Adair TH. Growth regulation of the vascular system: an emerging role for adenosine[J]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2005 Aug;289(2):R283-R296. Review.
[3] 胡诞宁. 眼科细胞培养的特殊技术[J]. 中华眼科杂志,2003,39(5):312-316.
[4] 蔡克波. VEGF家族及其受体与新生血管形成[J]. 医学综述,2002,8(2):70-72.
[5] 谢熹玮. 血管内皮生长因子在糖尿病视网膜病变发病机制中的研究进展[J]. 国外医学眼科学分册,2004,4,28(2):103-106.
[6] Fredholm BB, IJzerman AP, Jacobson KA, et al. International Union of Pharmacology. XXV. Nomenclature and classification of adenosine receptors[J]. Pharmacol Rev,2001 Dec;53(4):527-552.
[7] Fredholm BB, Abbracchio MP, Burnstock G, et al. Nomenclature and classification of purinoceptors[J]. Pharmacol Rev,1994 Jun;46(2):143-156. Review.
[8] Taomoto M, Mcleod DS, Merges C, et al. Localization of adenosine A2a receptors in retinal development and oxygen-induced retinopathy[J]. Invest Ophthalmol Vis Sci,2000,41(1):230-243.
[9] Kvanta A, Seregard S, Sejersen S, et al. Localization of adenosine receptor messenger RNAs in the rat eye[J]. Exp Eye Res,1997,65(5):595-602.
[10] Blazynski C. Characterization of adenosine A2 receptors in bovine retinal pigement epithelial membranes[J]. Exp Eye Res,1993,56(5):595-599.
[11] King GL, Suzuma K. Pigment-epithelium-derived factor — a key coordinator of retinal neuronal and vascular functions[J]. N Engl J Med,2000,342(5):349-351.
[12] Feoktistov I, Goldstein AE, Ryzhov S, et al. Differential expression of adenosine receptors in human endothelial cells: role of A2B receptors in angiogenic factor regulation[J]. Circ Res,2002,90(5):531-538.
[13] Grant MB, Tarnuzzer RW, Caballero S, et al. Adenosine receptor activation induces vascular endothelial growth factor in human retinal endothelial cells[J]. Circ Res,1999,85(8):699-706.
[14] Leibovich SJ, Chen JF, Pinhal-Enfield G, et al. Synergistic up-regulation of vascular endothelial growth factor expression in murine macrophages by adenosine A2A receptor agonists and endotoxin[J]. Am J Pathol,2002,160(6):2231-2244.
[15] DH platt, M.Bartoli, A.EL-Remessy, et al. High glucose increases VEGF in bovine retinal endothelial cells via peroxynitrite-induced activation of src kinase[R]. Invest Ophthalmol Vis Sci,2005,46:E-Abstract 4195. 上一页 [1] [2] |