前脂肪细胞的这两种培养方法都曾被不同研究者采用。我们同时用组织块法和酶消化法培养人眼眶前脂肪细胞,比较其利弊,组织块培养法所需要的组织标本量较少,培养方法简单,但在原代培养时组织块容易脱离瓶壁,生长欠均匀,传代前生长较缓慢,培养的细胞中混杂有少量成纤维细胞及其他细胞;而酶消化法培养的前脂肪细胞来源为经典的血管基质组分细胞,分离的细胞成分较单一,但分离方法较组织块法复杂,成本较高,并需要有足够的组织标本。
运用组织块法和酶消化法均能获得大量的前脂肪细胞,它们在6~7代内有较强的增殖和分化能力。我们的研究显示,从两种方法所获得的前脂肪细胞,它们的形态及生物学特征一致。研究者可根据自己的需要选择不同的培养方法:例如,若需对TAO或其他少见病患者进行前脂肪细胞的原代培养,由于标本组织不易获得,且组织量少,我们建议采用组织块培养法以获得较多的前脂肪细胞。若符合实验要求的组织标本容易获得,且组织标本量较多,我们建议采用消化法培养,以便较快获得单一的前脂肪细胞。 基金项目:中国湖南省科技厅重点资助项目(No.05JJ-148)
【参考文献】 1 Nair S, Lee YH, Rousseau E, Cam M, Tataranni PA, Baier LJ, Bogardus C, Permana PA. Increased expression of inflammation-related genes in cultured preadipocytes/ stromal vascular cells from obese compared with non-obese Pima Indians. Diabeotlogia ,2005;48(9):1784-1788
2 Smith TJ, Koumas L, Gagnon A, Bell A, , , . Orbital fibroblast heterogeneity may determine the clinic presentation of thyroid-associated ophthalmopathy. J Clin Endocrinol Metab ,2002;87(1):385-392
3 Patrick CW Jr, Wu X. Integrin mediated preadipocyte adhesion and migration on laminin-1. Ann Boimed Eng ,2003;31(5):505-514
4 Patrick CW Jr, Zheng B, Johnston C, Reece GP. Long-term implantation of preadipocyte-seeded PLGA scaffolds. Tissue Eng ,2002;8(2):283-293
上一页 [1] [2] [3] [4] |