灯盏花中所含的三种单体成分--咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷均能促进体外培养的视网膜神经细胞存活,且以咖啡酸活性最强。日前,由成都中医药大学的张艺等人完成的一项国家自然科学基金课题为将灯盏花拓展应用于青光眼的治疗提供了实验依据。
青光眼是以视盘呈典型凹陷及视网膜神经节细胞死亡为特征的眼病。目前青光眼的治疗局限于降低眼压,尚缺乏有效的保护视网膜神经细胞(RN)的药物。灯盏花主要含有以野黄芩苷为主的黄酮、香豆素、酚酸类等化合物,具有散寒解表,活血舒筋,止痛消积等功效,临床广泛用于治疗高血压、心律失常及心绞痛。随着对其药理研究的深入,灯盏花的应用范围正在拓展,青光眼的治疗就是一例。但其保护RN的具体成分尚不明确。
本研究以灯盏花中的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷为对象,观察它们对体外培养的视网膜神经细胞存活的影响。具体做法是:采用胰酶消化法将18只出生2~3天的乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层黏连蛋白(LN)包被的96孔板中;于培养3天后,分别加入等渗磷酸盐缓冲液及不同含量的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷溶液继续培养两天,采用四唑盐比色法测量其存活细胞的吸收值,同时对部分细胞行Nissei体染色检查。
Nissei体染色检查结果表明,培养5天的存活细胞大部分为神经细胞,与空白对照组比较,咖啡酸含量在3.9~1000微克/毫升、东莨菪内酯、野黄芩苷含量在250~1000微克/毫升时,神经细胞的吸收值均明显增加。
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