摘 要：目的 探讨角膜移植术后病人外周血免疫功能的动态变化。方法 检测26例行带环形巩膜全角膜移植术(CST)和76例部分穿透性角膜移植术(PKP)病人的术前和术后不同时期体液与细胞免疫指标，并进行对比分析。结果 角膜移植病人的细胞和体液免疫术前与术后比较有显著差异(P＜0.05)，带环形巩膜全角膜移植术病人体液免疫持续时间较部分穿透性角膜移植术组延长，细胞免疫持续时间差异无显著性。结论 带环形巩膜全角膜移植术后体液免疫较部分穿透性角膜移植反应程度高，可能是排斥率高的原因之一。
Comparative studies on cell-mediated and humoral immunity of patients with CST and PKP
JIANG Guo-Min,YANG Chao-Zhong,XU Ze-Lin,GENG Yan
(Department of Ophthalmology,the Second Affiliated Hospital,Qingdao Medical College,Qingdao 266042,Shandong Province,China)
Abstract：Objective To explore the immunity of total cornea with circle lameller sclera transplantation(CST) and part penertrating keratoplasty(PKP).Methods Twenty-six cases of CST and 76 cases of PKP were observed and compared on T-cell subset and their pre-operative and post-operative humoral immunity were analyzed.Result The existing time of humoral immunity of CST was longer than that of PKP,but there was no significant changes in T-cell immunity between the two groups.Conclusion The existing time of humoral immunity in CST was longer than that in PKP,one reason may be that the rate of rejection in CST is higher.
Key words：corneal tansplantation;cell-mediated immunity;humoral immunity▲
本文报告1993～1997年，在我院行角膜移植术患者术前和术后的外周血免疫功能状态动态变化规律，结果如下。
1 材料和方法
1.1 临床资料 本组病人共102例(102眼)，男70例，女32例，平均年龄41a；其中角膜溃疡23例，包括铜绿假单胞菌性角膜溃疡7例，真菌性角膜溃疡12例，不明原因溃疡4例，严重化学伤3例，角膜白斑76例。102例病人分为带环形巩膜全角膜移植组26例和部分穿透性角膜移植术组76例。
1.2 手术方法
1.2.1 带环形板层巩膜瓣全角膜移植 (1)供体移植片制作：严格无菌操作，植片制作由保存方式不同而异。完整眼球保存者，在距离角膜缘后4mm用自制巩膜环钻钻切巩膜，厚达1/2板层，板层分离至巩膜缘，再斜形穿透入前房，取下巩角膜植片，待用；角巩膜瓣式保存者，将植片放于凹状硅胶角膜枕上，内皮面向上，小心固定，剖剪环形板层巩膜瓣达前述厚度，待用；(2)受体植床制作：沿角膜缘环形剪开球结膜，缝线固定眼球，止血，用自制巩膜环钻钻切受体巩膜，角膜缘后3mm(较植片＜1mm)板层分离至角膜缘前界，尽量保护房角组织；(3)缝合方法：将植片置于植床上，9-0号尼龙线间断缝合板层巩膜缘，共20～30针；
1.2.2 部分穿透性角膜移植术方法同以往报道［1］。
1.2.3 供体角巩膜材料 使用新鲜湿房保存材料外，其余为眼库保存角巩膜材料，包括深低温保存材料、甘油保存材料等，材料均取自死亡后2～12h，年龄1～59a，平均年龄37a。
1.3 免疫功能检测 所有病人分别于术前1～3d、术后7、30、90、180d及1a检测外周血免疫球蛋白、T细胞亚群及补体C3、C4的变化。由美国Beckman公司生产的Array特定蛋白分析仪，采用免疫浊度法分析免疫球蛋白和补体；T细胞亚群检测试剂盒由北京邦定生物制剂中心提供。
2 结果
2.1 体液免疫动态变化 角膜移植手术前后体液免疫动态变化见表1。
表1 角膜移植手术前后体液免疫动态变化
Table 1 Changes of humoral immunity Pre-operation and Post-operation corneal transplant (g·L-1)
| |
IgA |
IgG |
IgM |
C3 |
C4 |
| CST |
PKP |
CST |
PKP |
CST |
PKP |
CST |
PKP |
CST |
PKP |
| Pre-operation |
1.79 |
1.82 |
10.82 |
10.72 |
0.62 |
0.52 |
0.82 |
0.76 |
0.51 |
0.45 |
| Post-operation 7d |
3.52 |
2.42 |
15.20 |
14.52 |
1.69 |
1.67 |
0.54 |
0.65 |
0.32 |
0.39 |
| Post-operation 30d |
3.58 |
3.18 |
16.13 |
15.61 |
2.52 |
1.92 |
0.48 |
0.58 |
0.29 |
0.32 |
| Post-operation 90d |
3.10 |
3.01 |
16.41 |
15.41 |
1.40 |
1.40 |
0.50 |
0.68 |
0.40 |
0.41 |
| Post-operation 180d |
3.01 |
2.01 |
15.36 |
13.56 |
1.89 |
0.98 |
0.56 |
0.75 |
0.41 |
0.47 |
| Post-operation 1a |
1.85 |
1.84 |
12.42 |
11.42 |
0.85 |
0.65 |
0.82 |
0.80 |
0.49 |
0.46 |
2.2 细胞亚群动态变化 角膜移植手术前后T细胞亚群动态变化见表2。
表2 角膜移植手术前后T细胞亚群的动态变化
Table 2 Changes of cell-mediated immunity Pre-Operation and Post-Operation corneal transplant (%)
| |
CD3 |
CD4 |
CD8 |
CD4/CD8 |
| CST |
PKP |
CST |
PKP |
CST |
PKP |
CST |
PKP |
| Pre-operation |
63.21 |
63.20 |
41.92 |
40.60 |
34.52 |
31.52 |
1.25 |
1.15 |
| Post-operation7d |
64.72 |
61.72 |
37.26 |
40.32 |
31.92 |
32.61 |
1.16 |
1.21 |
| Post-operation30d |
70.57 |
70.87 |
53.47 |
53.44 |
37.57 |
36.75 |
1.42 |
1.54 |
| Post-operation90d |
67.10 |
68.10 |
58.63 |
55.63 |
38.99 |
38.19 |
1.50 |
1.57 |
| Post-operation180d |
68.10 |
68.51 |
45.21 |
49.21 |
36.92 |
36.60 |
1.22 |
1.52 |
| Post-operation1a |
68.21 |
63.21 |
44.25 |
42.25 |
36.98 |
32.68 |
1.19 |
1.19 |
由表1可见，角膜移植术后血清免疫球蛋白值呈逐渐升高趋势，术后30d时达到高峰。可持续至术后90～180d，术后1a时便渐降至术前水平。经统计学处理：术后7、30、90、180d时所测得的IgA、IgG、IgM值分别与术前、术后1a相比有差异性(P＜0.05)。术后1a与术前值比较P＞0.05无显著差异，同时发现，带环形巩膜瓣全角膜移植组免疫球蛋白升高所持续的时间较部分穿透性角膜移植组延长1～2mo，IgG和IgM比较有显著差异(F值分别为43.33和10.88，P＜0.05)。
C3、C4值术后呈逐渐下降，术后30d时降至最低水平，术后0.5～1a时便恢复术前水平。经统计学处理：术后7、30、90、180d的C3、C4值均较术前、术后1a值低，P＜0.05，差异显著。术后1a与术前值比较差异无显著性(P＞0.05)。说明排斥反应时有较多免疫复合物形成，从而消耗了较多的补体成分。而带环形巩膜瓣全角膜移植组C3、C4与部分穿透性角膜移植组比较无显著差异(F值分别为0.67和0.31，P＞0.05)。
由表2可见，2组中T3、T4及T8值术后7d内均无明显改变，与术前比较均无显著差异(P＞0.05)，术后30d都开始升高，180d后呈下降趋势，术后1a基本降至正常水平。经统计学处理，术后30、90、180d的T3、T4较术前、术后7d、1a值增加显著(P＜0.01)，术后7d、1a与术前值比较，无显著差异(P＞0.05)。T8值术后亦呈增加趋势，1～3mo达高峰，但增加幅度小，与术前及术后1a值比较无显著差异(P＞0.05)。2组在持续时间上相同。2组中T4/T8比值均于术后1～3mo时最高，与术前、术后7d、90d、1a比无显著差异(P＞0.05)。而带环形巩膜瓣全角膜移植组术后T3、T4及T8值与部分穿透性角膜移植组比较无显著差异(F值分别为1.15、0.011和1.18，P＞0.05)。
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