结果

　　一、RCS大鼠视网膜视细胞凋亡

　　TUNEL染色，RCS大鼠生后第25天视网膜外核层视细胞核出现阳性染色，细胞核呈棕色染色（图1），随鼠龄增加，阳性染色的细胞核数逐渐增加，第30～35天时达高峰（图2，3）。以后逐渐减少，至生后第60天时无阳性染色的细胞核。

图1 RCS大鼠生后第 25天视网膜， 可见少许染色阳性的视细胞核 （箭头示）TUNEL×200

图 2，3 RCS大鼠生后第30、 35天视网膜，可见阳性染色的视细胞核数明显增加 （箭头）TUNEL×200

　　二、RCS大鼠视网膜视细胞p53蛋白表达

　　p53蛋白免疫组化染色，RCS大鼠生后第25天，视细胞内节部位出现较弱的阳性染色，呈棕色颗粒状（图4）。第28～30天，阳性染色逐渐增强，阳性颗粒主要位于视细胞内节，少量位于细胞浆和细胞核（图5）。随鼠龄增加，视细胞内节的阳性染色程度逐渐减弱，视细胞核的阳性染色逐渐增强，生后第35天时，较多的细胞核呈阳性染色（图6）。至生后第45天时无阳性染色。视网膜其它各层均为阴性染色。正常同龄SD大鼠视网膜为阴性染色。

图 4 RCS大鼠生后第25天视网膜， 视细胞内节可见阳性染色 （白箭头） 免疫组织化学染色×200

图 5 RCS大鼠生后第 28 天视网膜， 视细胞内节阳性染色 （白箭头） 明显增强免疫组织化学染色×200

图 6 RCS大鼠生后第 %26#02;%26#01; 天视网膜， 视细胞内节仍可见阳性染色 （白箭头） ， 并有较多视细胞核呈阳性 （箭头）免疫组织化学染色×200

　　三、RCS大鼠视网膜视细胞p53mRNA表达

　　p53mRNA原位杂交，与正常SD大鼠视网膜相比，RCS大鼠生后第25～35天时，视网膜外核层出现阳性染色，第28天时明显（图7，8），主要位于视细胞的胞浆内（图9），视网膜其它各层无阳性染色。

　　p53 mRNA RT-PCR，产物为232 bp，与预期长度相符。各鼠龄RCS大鼠和正常SD大鼠视网膜均有产物。生后第25～35天时RCS大鼠视网膜产物量偏高（图10）。重复实验，所得结果相似。

图 7 视网膜P53 mRNA原位杂交， 可见正常SD大鼠视网膜，ONL示外核层， 呈阴性?位杂交阳性染色×100

图 8 视网膜P53 mRNA原位杂交， 生后第28天RCS大鼠视网膜，ONL 示外核层呈显著阳性染色原位杂交阳性染色×100

图 9 视网膜P53 mRNA原位杂交，局部放大， 显示阳性染色主要位于视细胞胞浆内 （箭头）?位杂交阳性染色×400

1～4示对应的β-actin mRNA产物　5～8示第25、35、60天RCS大鼠及第35天正常SD大鼠视网膜p53 mRNA产物　9示DNA marker

10　视网膜p53 mRNA RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳

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