中华眼科杂志 1999年第2期第35卷 论著
作者：魏玲格 王长龄 段惠军 张志勇
单位：050000 石家庄，河北医科大学第二附属医院眼科［魏玲格(研究生,现在该医院核医学科)王长龄］，口腔内科（张志勇）；河北医科大学病理教研室（段惠军）
关键词：糖尿病视网膜病；糖尿病肾病
【摘要】 目的 寻找糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy ,DR)和糖尿病性肾病(diabetic nephropathy ,DN)两者间组织学改变的关系。方法 采用普通电镜和免疫组化电镜方法，并经电镜下定量分析视网膜和肾小球毛细血管基底膜的厚度及基底膜上负电荷位点的计数。结果 DR和DN的毛细血管基底膜呈逐渐增厚并伴有负电荷位点的减少。结论 DR和DN的发生、发展有其共同的形态学基础。DR和DN的微血管病变也有其不一致性。
Relationship between retinal and glomerular microvascular lesions in experimental diabetes in ratWEI Lingge, WANG Changling, DUAN Huijun, et al. Department of Ophthalmology, The Second Affiliated Hospital, Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000
【Abstract】 Objective To evaluate the relationship between diabetic retinopathy (DR) and diabetic nephropathy (DN).Methods The thickness of retinal capillary basement membrane (RBM) and glomerular basement membrane (GBM) and their anionic sites were quantitatively analyzed by electron microscopy and immunohistochemical methods.Results RBM and GBM became gradually thickened with the development of diabetes. The thickened basement membrane was accompanied with decrease of anionic sites in number.Conclusion DR and DN share partly the pathological process, and there are also some incoordinate phenomena in the microvascular lesion.
【Key words】 Diabetic retinopathy Diabetic nephropathies
糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy ,DR)和糖尿病性肾病(diabetic nephropathy ,DN)的研究在世界范围内倍受注目。然而有关的研究多集中于临床症状、分期及辅助检查结果的对比分析。而关于DR与DN之间的关系、两者的病理基础，特别是超微结构变化的异同，尚未见系统的对比研究。我们采用普通电镜和免疫组化电镜等方法对糖尿病动物模型进行了系统观察，着重对比分析视网膜和肾小球微血管病变，试图寻找DR和DN的相关性，以期阐明其发生、发展的规律，为临床探索或延缓糖尿病患者并发DR或DN的手段提供理论依据。
材料和方法
一、动物模型制备
SD大鼠40只, 雌雄各半, 体重120～170 g, 随机分为实验和对照组。实验组：28只大鼠，左下腹腔注射链脲佐菌素(美国Sigma公司产品)按55 mg/kg 体重诱发糖尿病。对照组：12只大鼠，同时左下腹腔注射等体积缓冲液。分别于注射后2周，1、3及6个月处死实验组动物7只, 对照组动物3只。动物处死前检测其尿糖、24 h尿蛋白量、血糖、肌酐和尿素氮。
二、电镜样品制备
大鼠处死后立即摘除眼球，迅速将视网膜组织切成1.5 mm×1.5 mm小片，肾皮质组织切成1 mm×1 mm×1 mm小块，戊二醛固定，逐级酒精脱水，树脂包埋，超薄切片，枸椽酸铅、醋酸铀双重染色，日立-H 600透射电镜下观察。
三、免疫组化电镜样品制备
首先将视网膜和肾皮质电镜标本用多聚亚胺染色，然后用戊二醛和磷钨酸液混合固定，以下步骤同普通电镜。电镜下观察视网膜毛细血管基底膜(retinal capillary basement membrane, RBM)和肾小球毛细血管基底膜(glomerular basement membrane ,GBM)负电荷位点的改变。
四、基底膜厚度的测量及基底膜上负电荷位点的计数
每份视网膜和肾脏电镜标本及免疫组化电镜拍摄的毛细血管照片各10张(30 000倍)，选择基底膜垂直横断的区域，每个毛细血管选择10个点，每点数1 000 nm，求其平均数作为该毛细血管基底膜的厚度及该毛细血管每1 000 nm基底膜上负电荷位点的数目。
五、统计学处理方法
本文数据采用两样本均数比较的t检验法，进行统计学处理。
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