中国中医眼科杂志 2000年第4期第10卷 实验研究

作者：亢泽峰　庄曾渊　万素君　李庆生　王勒渝　黄霞珍　毕振春　解荣庆

单位：亢泽峰　庄曾渊　李庆生(中国中医研究院眼科医院，北京　100040)；万素君　王勒渝　黄霞珍　毕振春　解荣庆(中国中医研究院广安门医院)

关键词：中药；血虚证；大鼠；视网膜；病理

　　［摘　要］目的　观察益气养血活血中药对实验性血虚证大鼠视网膜病理改变的影响。方法　将70只Wistar大鼠随机分为正常组、对照组、大剂量给药组、小剂量给药组和预防组。除正常组外，其它4组用乙酰苯肼造成血虚证模型。各血虚组大鼠治疗20d、40d后分别每组随机取7只鼠的视网膜进行光镜观察，40d每组随机取2只眼视网膜作电镜观察。结果　预防组大鼠视网膜未发现病理改变；中药治疗组视网膜病理损害程度轻于对照组；其中大剂量组治疗40d检查的结果更为明显。结论　益气养血活血中药对早中期视网膜病变具有较好的防治作用。

　　中图分类号：R361.2；R289.5　　文献标识码：A

　　文章编号：1002-4379(2000)04-0199-06

An observation of influence of traditional Chinese medicine for yiqiyangxue and huoxue(益气养血活血)therapeutics on retinal pathologic change in experimental diabetic rats with xuexu(血虚)syndrome

KANG Zefeng,ZHUANG Zengyuan,WAN Sujun,et al.

　　(Eye Hospital of China Academy of Traditional Chinese Medicine,Beijing 100040,China)

　　［Abstract］OBJECTIVE　To study the influence of the traditional Chinese medicine for xuexu(血虚)；therapy on retinal pathologic changes in the experimental rats with xuexu syndrome.METHODS　Seventy Wistar rats were divided random into normal group,control group,treated group with high dose,group with low dose,and prevention group.Except for the normal group,experimental xuexu syndromes were occurred in other 4 groups by acetphenylhydrazine (APH).Seven respective samples of retina from each group with xuexu syndrome and normal group were inspected by light microscopy at 20 days and 40 days after treatment.Two samples were inspected by electric microscope at 40 days after treatment in the each group with experimental xuexu syndromes.RESULTS　Any retina pathologic change did not be found in the prevention group.The degree of retina pathologic damage was lighter in the treated groups than in the control group,the effect was more obvious in the group with high dose at 40 days after the treatment.CONCLUSION　Traditional Chinese medicine for yiqiyangxue and huaxue(益气养血活血) therapy could play a positive role in the prevention and cure of the retinal pathologic damages induced by experimental xiexu syndrome among the early and middle stage.

　　［Key words］traditional Chinese medicine;xuexu(血虚)syndrome;rats;retina;pathology

　　血与眼的关系非常密切，血虚、血不濡目是引起目不明的重要原因。近年来在临床中应用益气补血活血的中药对血虚证视网膜疾病取得一定的疗效，为了对临床用药提供确切依据和探讨其作用机制，从1999年9月～2000年2月我们观察了临床疗效较好的益气补血活血的补血汤对乙酰苯肼(APH)所致的实验性血虚证大鼠视网膜病理改变的影响，报道如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　实验材料

　　实验动物：健康雄性Wistar大鼠，体重200g±50g，由中国军事医学科学院实验动物繁殖厂提供。

　　药品与制剂：实验用药材购自北京市药材公司，经广安门医院生药室鉴定为黄芪、当归、葛根、枸杞子。前两味按《内外伤辨惑论》原方，两味药5∶1组成，剂量分别为30g、6g，后两味各12g，洗净后加10倍水浸泡30min加热至沸，30min后过滤。合并2次滤液，加热浓缩至相当每ml含2g生药，4℃冰箱储存备用。

　　乙酰苯肼(APH)北京化工厂产品，批号：980220。

　　仪器：日本5150血液分析仪，日本OLYMPUS五目镜，PHILIPS透射电镜EM400T及瑞典LKB-8800超薄切片机。

　　1.2　实验方法

　　1.2.1　造模方法：Wistar大鼠70只，随机分为5组，即正常组、对照组、给药大、小剂量组和预防组。正常组为自由摄食饮水不加任何处理，其他4组大鼠依次间隔两日皮下以1%APH*NS注射液，剂量为10ml/kg体重注射2次，以后浓度与剂量减半皮下注射，6次为1周期，周期递增APH lml/kg体重，共计注射36次，108d停止，进行药物的治疗观察。

　　1.2.2　分组与给药：以1.2.1分组，预防组在接受APH同时灌胃给药，给药组在造模后第一日灌胃给药，每日1次。小剂量为3ml/(kg*d)，预防组口服大剂量中药，对照组口服等量(大剂量)消毒饮用水，正常组不作任何处理。

　　1.2.3　病理组织学样品制备：于造模及给药前后剪尾采血外周红细胞计数，观察其下降率变化；同时观察大鼠症状体征变化。对造模后治疗20d、40d分别每组随机取7只大鼠，充分麻醉取视网膜制片^〔1〕作光镜观察，40d每组大鼠随机取2只眼的视网膜制片作电镜观察。

　　1.2.4　统计学处理：测定值均用x　—±s表示，采用t检验。

　　2　结果

　　2.1　一般体征

　　造模后对照组、大小、剂量组大鼠呈较重血虚状态，表现出粘膜和爪甲苍白、皮毛无光泽，乏力，睑裂变小，反应迟钝等体征；预防组大鼠也呈血虚状态，但程度较造模各组明显轻，尤其是体重、状态等差异明显，停止注射APH后继续给补血汤20d、40d，血虚症状、体征消失较快，40d时为轻度血虚状态。小剂量组在给药20d大鼠体征较给药前轻度好转，40d则又有所好转。大剂量组20d状态较给药前好转，40d恢复明显。对照组在40d后症状体征也有所好转。

　　2.2　补血汤对血虚证大鼠模型红细胞下降率的影响

表1　给药20d前后各组红细胞的下降率

　　(±s，n=7)

　　注：治疗前后比较：对照组t=1.9013,P＞0.05;小剂量组、大剂量组、预防组t=3.3559,10.5719，2.4793，均P＜0.05;组间比较：治疗前与正常组比较：1)t=7.5447,13.457，12.4186，均P＜0.01；与对照组比较2)t=5.3991，P＜0.01；治疗后与正常组比较3)t=6.3428，7.4276，8.674，均P＜0.01；与对照组比较：4)t=5.1734，P＜0.01

表2　给药40d前后各组红细胞的下降率

　　(±s，n=7)

　　注：治疗前后比较：对照组t=2.8131，P＜0.05，其余3组t=6.1235，12.7097，6.4359，均P＜0.01；组间比较：治疗前与正常组比较：1)t=9.8818，11.7675，10.3907，均P＜0.01；与对照组比较：2)t=9.625，9.8818，均P＜0.01；治疗后与正常组比较：3)t=9.4763，12.0992，均P＜0.01；与对照组比较：4)t=8.2214，P＜0.01　5)与4)比较：t=3.0727，P＜0.01

2.3　补血汤对血虚证大鼠模型视网膜病理改变的影响

　　2.3.1　治疗20、40d血虚证大鼠视网膜组织形态学的观察：①正常组：光镜下视网膜组织结构正常，10层结构清楚，内核层及外核层细胞排列整齐、规则。预防组无病变同正常组(图1)。②对照组：20d视网膜严重水肿。视神经纤维层、内网层及视杆锥层明显疏松、水肿、结构紊乱，内核层和外核层细胞间明显水肿、疏松，细胞肿胀、排列明显紊乱(图2)，视网膜明显增厚。40d较20d稍好转，水肿稍减轻(图3)。③小剂量组：治疗20d视神经纤维层疏松、水肿，内核层及外核层细胞之间明显疏松、排列紊乱、水肿，视杆视锥层疏松、水肿较明显。视网膜中度水肿、增厚(图4)。40d内颗粒层疏松、水肿程度较20d减轻，余基本病变同20d(图5)。④大剂量组：治疗20d视锥杆层疏松、紊乱，外核层细胞之间疏松，排列较不整齐，视网膜水肿、增厚(图6)，40d除外颗粒层与20d相同外，其余均较20d明显好转(图7)。

　　2.3.2　治疗40d血虚证大鼠视网膜超微结构的观察：正常组、预防组：正常光感受器细胞排列整齐，细胞间隙较密，内节线粒体形态结构正常、嵴清楚，外节膜盘结构清楚排列规律整齐(图8、图9)。对照组：视杆锥细胞外节膜盘结构变形、扭曲、肿胀，呈不规则扩散(图10)；内节线粒体肿胀，嵴模糊或脱嵴，有的呈空泡状(图11)。小剂量组：视杆锥细胞外节膜盘排列紊乱疏松，部分断裂(图12)；内节线粒体肿胀、变大变圆，嵴不清楚(图13)。大剂量组：视杆锥细胞外节膜盘结构变疏松，排列较紊乱(图14)；有的内节线粒体肿胀，嵴较清楚(图15)。

[1] [2] 下一页