3  讨论

     白内障手术与晚期AMD相关的临床资料提示蓝光暴露与渗出型AMD的发生发展有关[3]。本研究结果证实蓝光对RPE细胞有损伤作用，含有A2E的RPE细胞受持续低强度蓝光照射后，细胞活力下降、ROS含量增加、GSH含量降低、VEGF分泌量上调而PEDF分泌量下调，而蓝光滤过型IOL能够减轻光损伤，明显降低ROS和VEGF含量。

    在该研究中，用低强度蓝光持续照射含有A2E的RPE细胞，并观察蓝光滤过型IOL和紫外线阻挡型IOL的保护作用，结果发现蓝光滤过型IOL能明显提高RPE细胞的细胞活力。有报道蓝光滤过型IOL (Alcon AcrySof?誖 Natural，SN60AT) 对RPE细胞蓝光、绿光和白光照射有保护作用[4]；还有研究者发现黄色IOL（YA60BB， Hoya）同传统的紫外线阻挡型IOL相比，能降低白光对含A2E的RPE细胞的损伤[5]。这些实验在设计方案上存在差异，但结果都证实了蓝光滤过型IOL对RPE细胞有保护作用。

    本研究发现，蓝光照射含有A2E的RPE细胞后，细胞产生大量的ROS，GSH水平明显下降。光氧化反应是ROS的主要来源，蓝光导致RPE细胞光化学损伤的机制还不完全清楚，而ROS可能是蓝光损伤的介导物。RPE细胞摄取A2E后暴露于短时间高强度蓝光，发生细胞凋亡[4，6]。本研究用低强度蓝光持续照射，同时观察到细胞活力下降，VEGF分泌增加。短时间高强度光照会导致细胞凋亡，而低强度持续照射时，对细胞产生氧化应激，细胞启动防御机制。急性高强度和慢性低强度光照射对RPE细胞的不同影响和机制及其在渗出型AMD发病中的作用还需要进一步研究。

    RPE细胞能够合成和分泌多种细胞因子，其中VEGF和PEDF是目前已知最重要的血管形成促进和抑制因子，两者的协同作用在CNV形成中起关键作用。正常情况下，两者表达处于动态平衡，病理损伤时平衡破坏，血管异常增生[7]。该研究观察到蓝光照射导致RPE细胞分泌VEGF的量上调而PEDF下调，VEGF是一种促血管生成因子，能够增加血管的通透性，从而促进CNV的生成[8]。在糖尿病患者和糖尿病动物模型中观察到过度表达VEGF能够增加视网膜血管的通透性[9-10]。PEDF是血管生成的抑制因子，最初在培养的RPE细胞中发现[11-12]。在增生性糖尿病性视网膜病变患者的玻璃体液中发现PEDF含量下降[13]。血管通透性增加也是新生血管的一个重要致病因素，PEDF对血管周细胞有保护作用，并可通过上调VEGF-C及其受体VEGF-R3的表达，对抗VEGF引起的血管通透性增加[14]。研究结果可能有助于解释白内障手术增加渗出型AMD发生率的原因[3]，可以推断蓝光滤过型IOL同传统紫外线阻挡型IOL相比，可能能够预防和阻止渗出型AMD的发生发展。

    总之，蓝光照射能够损伤含有A2E的RPE细胞，RPE细胞的损伤是光感受器细胞损伤、AMD发生的预兆。本研究推断，蓝光滤过型IOL同传统紫外线吸收型IOL相比，对A2E介导的RPE细胞光损伤有保护作用，能够降低光诱导的ROS和VEGF水平，从而降低渗出型AMD发生的风险。但这一结论尚需进行长期大规模的临床试验研究来证实。

   【参考文献】

[1] 王雨生，严密，杨抚华. 视网膜色素上皮细胞培养技术及其应用[J]. 中华眼底病杂志，1994，10(2)：124-128.

[2] Parish CA， Hashimoto M， Nakanishi K， et al. Isolation and one-step preparation of A2E and iso-A2E， fluorophores from human retinal pigment epithelium[J]. Proc Natl Acad Sci USA， 1998，95(25)：14609-14613.

[3] Wang JJ， Klein R， Smith W， et al. Cataract surgery and the 5-year incidence of late-stage age-related maculopathy：pooled findings from the Beaver Dam and Blue Mountains eye studies[J]. Ophthalmology，2003，110(10)：1960-1967.

[4] Sparrow JR， Miller AS， Zhou J. Blue light-absorbing intraocular lens and retinal pigment epithelium protection in vitro[J]. J Cataract Refract Surg，2004，30(4)：873-878.

[5] Yanagi Y， Inoue Y， Iriyama A， et al. Effects of yellow intraocular lenses on light-induced upregulation of vascular endothelial growth factor[J]. J Cataract Refract Surg，2006，32(9)：1540-1544.

[6] Sparrow JR， Nakanishi K， Parish CA. The lipofuscin fluorophore A2E mediates blue light-induced damage to retinal pigmented epithelial cells[J]. Invest Ophthalmol Vis Sci.2000，41(7)：1981-1989.

[7] Gao G， Li Y， Zhang D， et al. Unbalanced expression of VEGF and PEDF in ischemia-induced retinal neovascularization[J]. FEBS Lett，2001，489(2-3)：270-276.

[8] Witmer AN， Vrensen GF， Van Noorden CJ， et al. Vascular endothelial growth factors and angiogenesis in eye disease[J]. Prog Retin Eye Res，2003，22(1)：1-29.

[9] Funatsu H， Yamashita H， Ikeda T， et al. Vitreous levels of interleukin-6 and vascular endothelial growth factor are related to diabetic macular edema[J]. Ophthalmology，2003，110(9)：1690-1696.

[10] Zhang SX， Ma JX， Sima J， et al. Genetic difference in susceptibility to the blood-retina barrier breakdown in diabetes and oxygen-induced retinopathy[J]. Am J Pathol，2005，166(1)：313-321.

[11] Dawson DW， Volpert OV， Gillis P， et al. Pigment epithelium-derived factor：a potent inhibitor of angiogenesis[J]. Science，1999，285(5425)：245-248.

[12] Tombran-Tink J， Barnstable CJ. PEDF：a multifaceted neurotrophic factor [J]. Nat Rev Neurosci，2003，4(8)：628-636.

[13] Duh EJ， Yang HS， Haller JA， et al. Vitreous levels of pigment epithelium-derived factor and vascular endothelial growth factor：implications for ocular angiogenesis[J]. Am J Ophthalmol，2004，137(4)：668-674.

[14] Liu H， Ren JG， Cooper WL， et al. Identification of the antivasopermeability effect of pigment epithelium-derived factor and its active site[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2004，101(17)：6605-6610.

上一页  [1] [2]