张自峰1 周健1 惠延年1 张健2 刘新平2

药立波2

第四军医大学西京医院眼科 全军眼科研究所 陕西省西安市 710032

目的 建立培养人晶状体上皮细胞衰老模型，并检测新基因NDRG2 （N-myc downstream regulated gene 2）在衰老晶状体上皮细胞中的表达，以探讨NDRG2与晶状体上皮细胞衰老的相关性。

方法 分别采用不同低浓度（10μM、20μM、50μM、100μM和200μM）的H2O2，长期（2～3W）刺激培养人晶状体上皮细胞（SRA01/04），建立晶状体上皮细胞衰老模型，通过细胞形态学观察，细胞活力（MTT法）、细胞增殖力（Brdu掺入法）、细胞周期（流式细胞仪法）和衰老标志物（衰老相关β半乳糖苷酶染色）等生物学指标的检测，鉴定SRA01/04细胞衰老，并采用Western blot方法检测Ndrg2蛋白在衰老晶状体上皮细胞中的表达情况。

结果 SRA01/04细胞经低浓度H2O2长期刺激后，细胞群体中逐渐出现大量胞体平伏、体积变大的细胞；表现出细胞活力下降，增殖力降低，细胞周期阻滞等细胞衰老表型；衰老相关β-半乳糖苷酶阳性细胞比例约为87.3±6.2％。Western blot检测显示，衰老细胞中Ndrg2蛋白的表达量与对照组相比则明显增加。

结论 采用低浓度H2O2长期刺激的方法，成功建立了培养人晶状体上皮细胞衰老模型，Ndrg2蛋白在该细胞模型中的表达量增加，提示NDRG2基因与晶状体上皮细胞衰老相关。