余洪华 广州军区广州总医院眼科 510010
目的 检测缝线诱导角膜新生血管术后不同时间点角膜NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达的动态变化,以及地塞米松对其表达的影响;检测大鼠角膜移植术后不同时间点角膜植片NF-κB与ICAM-1、VEGF 的表达的动态变化,分析NF-κB与角膜移植排斥反应的关系及其与下游因子ICAM-1、VEGF表达的相关性。并观察环孢霉素A对NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达的影响。探讨NF-κB在角膜移植排斥反应及角膜新生血管形成中的作用。
方法 角膜缝线法建立角膜新生血管大鼠模型50只,随机分为两组: 生理盐水对照组、地塞米松治疗组,每组25只。各组术后不同时间点(1d,3d, 7d,12d,18d)随机取5只大鼠进行角膜新生血管生长评分,并于各时间点取新生血管化角膜,固定,切片。HE染色光镜下观察新生血管化角膜病理学变化;免疫组织化学染色(SABC法) 检测NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达。建立大鼠角膜移植模型60只,同基因移植组、同种异体移植组及同种异体移植+CsA治疗组,每组20只。各组术后不同时间点(3d,7d,12d,18d)随机取5只大鼠进行角膜移植排斥反应指数评分,并于各时间点取角膜植片,固定,切片。HE染色光镜下观察角膜植片病理学变化; 免疫组织化学染色(SABC法)检测NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达。
结果 角膜新生血管大鼠模型角膜,NF-κB与ICAM-1、VEGF分布于角膜上皮、基质层、角膜及新生血管内皮细胞,三者的表达部位一致,表达强度随各时间点逐渐增强。各时间点地塞米松治疗组角膜中NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达低于生理盐水组。对比观察发现:NF-κB表达强度与角膜新生血管评分成正相关,且与下游基因ICAM-1、VEGF的表达强度成正相关。角膜移植模型角膜,NF- κB与ICAM-1、VEGF分布角膜各层。各时间点,同种异体移植组角膜中NF-κB与ICAM-1、VEGF的表达高于同基因移植组,而低于同种异体移植+ CsA治疗组。对比观察发现:NF-κB表达强度与排斥反应指数(RI)成正相关,且与下游基因ICAM-1、VEGF 的表达强度成正相关。
结论 NF-κB的激活可能参与角膜移植排斥反应及角膜形成的发生;VEGF、 ICAM-1参与了角膜移植排斥反应及角膜新生血管形成过程,而这些细胞因子、粘附分子的产生,可能与 NF-κB激活有关;一定浓度的地塞米松对CNV大鼠角膜NF-κB胞核表达有抑制作用,而环孢霉素A 对角膜移植物中NF-κB胞核表达有抑制作用。
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