牛建军1 曾玉晓2 王一2 阴正勤2 刘康2 王仕军2 陈中山2
兰州军区乌鲁木齐总医院眼科 乌鲁木齐 830000
目的 研究重组人促红细胞生成素(Recombinat hu man erythropoietin,rhEPO)对培养的视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGCs)存活、突起生长及生长相关蛋白43(Growth associated protein 43,GAP-43)表达的影响,探讨rhEPO对培养RGCs可能的作用机制。
方法 分别用DMEM及含有rhEPO的DMEM对RGCs进行离体培养, 观察RGCs在体外存活的时间,测量2d、4d、6d RGCs的最长突起长度;免疫细胞化学检测GAP-43蛋白表达,并测定平均灰度值。
结果 DMEM组离体培养RGCs于6d~8d 死亡,而rhEPO组RGCs能存活10d~12d,存活时间较对照组显著延长(P<0.01)。培养2 d、4d、6d时,DMEM组最长突起长度依次为42.90±4.71μm、79.74± 8.49μm、110.02±10.79μm,rhEPO组依次为55.47±7.07μm、100.16±7.78μm、118.63±11. 50μm,培养2 d、4d时rhEPO组与对照组相比差异非常显著(P<0.01),6d时差异显著(P<0.05)。两组细胞在培养2d时GAP-43蛋白的表达水平较高,4d时GAP-43蛋白表达到高峰,6d时GAP-43的表达水平明显降低。各时间点rhEPO组RGCs GAP-43蛋白的表达均较对照组有明显增高,与对照组相比均有非常显著差异(P<0.01)。
结论 rhEPO可延长离体培养RGCs的存活时间和促进其突起的生长。 rhEPO可上调离体培养RGCs GAP-43的表达。rhEPO促进RGCs突起生长的作用可能通过上调 RGCs GAP-43的表达来实现。
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