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　　腺病毒介导PEDF体外转染的实验研究

　　于燕萍 颜华

　　天津医科大学总医院眼科  300052

　　目的：构建携带PEDF基因的重组腺病毒，为进一步基因治疗CNV奠定基础。

　　方法：RT-PCR扩增PEDF基因cDNA，将PEDF克隆入腺病毒表达载体质粒pDC316中并测序鉴定。利用腺病毒Admax系统，通过含有目的基因片段PEDF的穿梭载体pDC316/PEDF和病毒骨架质粒共转染293细胞的方法包装出重组腺病毒AdPEDF。利用PCR, Western Blot等方法对重组腺病毒进行鉴定。氯化铯密度梯度离心法纯化以得到高滴度的腺病毒。

　　结果：获得了表达PEDF的重组腺病毒。

　　结论：成功构建出携带PEDF基因的重组腺病毒，为更深入的基因治疗研究奠定了基础。

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