熊思齐  夏晓波

湘雅医院眼科410007

目的：观察促红细胞生成素(EPO)小干扰RNA对视网膜新生血管形成的抑制作用。

方法：设计并合成3条靶向EPO的siRNA，通过阳离子脂质体包裹转染NIH/3T3细胞。采用RT-PCR及免疫印迹技术检测细胞中EPO的表达水平，从而筛选出有效的EPOsiRNA序列。后将7d的C57小鼠置于浓度为(75±5)%高氧环境中生活5d， 然后回到正常氧环境中。小鼠于出氧舱后当日一只眼玻璃体腔内注射5μgEPOsiRNA， 另一只眼注射5μg非特异性siRNA作为阴性对照。FITC-dextran左心室造影视网膜铺片了解视网膜血管形态的改变；组织学切片计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量。

结果：设计的3条靶向EPO的siRNA中(siEPO1-3)，siEPO2对细胞中EPO抑制效率最高，抑制效率达到了90%。模型鼠玻璃体腔内注射siEPO2后，视网膜铺片结果显示：siEPO2注射组较模型组及阴性对照组新生血管芽及荧光素渗漏现象明显减少；组织学结果表明：siEPO2注射组突破视网膜内界膜的细胞数量较模型组及阴性对照组明显减少，差异有统计学意义。

结论：EPO小干扰RNA可有效抑制视网膜新生血管的形成， 有望成为治疗血管增生性视网膜病变的新途径。

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