李娜
天津医科大学眼科中心300070
目的:观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植到视网膜缺血再灌注大鼠玻璃体腔后存活、迁移、整合、分化和表达各种神经营养因子的情况,探讨其治疗机制。
方法:全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠MSCs,并用流式细胞仪检测其表面标志。采用前房加压法制作SD大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为对照加PBS组、对照加细胞组、缺血再灌注加PBS组和缺血再灌注加细胞组,损伤后各组玻璃体腔分别注入10 μl PBS和Dil标记的MSCs悬液10 μl。用免疫荧光显微镜观察移植细胞在玻璃体腔中的存活,迁移和整合到宿主视网膜情况;用免疫荧光和共聚焦显微镜观察其分化和各种神经营养因子bFGF、CNTF和BDNF的表达;应用RT-PCR和Western Blot技术进一步检测bFGF、CNTF和BDNF的mRNA和蛋白表达。
结果:移植到正常眼玻璃体腔的MSCs未发生迁移和分化,而移植到缺血再灌注眼玻璃体腔的MSCs发生了迁移,主要沿内界膜分布,仅少部分整合到神经节细胞层。移植的MSCs仅少数表达NSE和NF,但大部分表达神经营养因子。此外,移植MSCs缺血再灌注大鼠的视网膜神经节细胞计数多于未移植组,统计学比较差异有显著性。
结论:MSCs玻璃体腔移植对于治疗视网膜视神经疾病具有可行性。
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