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2 TGFβ抑制剂研究
TGFβ抑制剂研究主要包括抑制TGFβ及其受体的表达，阻止TGFβ和受体的结合，干扰受体激酶信号传递。其中干扰受体激酶信号传递的研究主要集中在TGFβI型受体激酶小分子抑制剂(SD208,LY2157299，SB431542等)研究，主要用于肿瘤治疗，目前尚处于临床前期。体外研究显示TGFβI型受体激酶小分子抑制剂可以有效阻断Smad磷酸化，减少肿瘤的转移，限制肿瘤生长和侵袭。但是其副作用也相当明显[16,17]。目前没有眼科领域的研究报道。
2.1抑制TGFβ及其受体相关基因表达主要包括RNA干扰技术和反义寡核苷酸技术 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指通过产生内源性特异序列的小干扰RNA（siRNA），诱导特异靶基因mRNA降解，从而特异性地抑制靶基因的转录后表达，引起转录基因沉默(transcriptional gene silencing, TGS)的现象[18,19]。RNAi特点是有选择地特异性抑制某种基因的表达，但并不完全阻断该基因的功能。RNAi技术可以特异性抑制TGFβ及其受体的基因表达，目前国内外学者已经使用该技术在动物体内进行了大量抗纤维化方面的研究[20]。其中Nakamura等[21]用根据人基因序列特异合成的TGFβII型受体（TβRII）siRNAs转染体外培养的人角膜纤维细胞并在局部炎症和纤维化鼠眼模型中引入鼠TGFβII型受体（TβRII）siRNAs，发现RNA干扰技术可以有效抑制TGFβ的作用。提示直接在眼部应用siRNAs 以下调TGFβII型受体的表达可能成为治疗眼部炎症和疤痕的方法之一。该技术的局限性在于短暂的时效性，给药途径和安全性。目前利用RNAi技术抑制TGFβ在眼科领域的应用尚处在动物实验和体外研究阶段。反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides, ASONs）技术是用人工合成或构建的反义寡核苷酸片段导入细胞内，根据碱基配对原理，与靶DNA或mRNA结合成双链或三链结构，阻断靶基因（DNA）的复制和转录或干扰靶mRNA的表达[22]。该技术的特点是具有高度特异性，不含病毒序列，不整合进入宿主染色体。1998年，全球首个反义寡核苷酸药物Vitravene(Fomivirsen)由美国FDA批准，用于治疗爱滋病患者的巨细胞病毒性视网膜炎[23]。2003年Cordeiro等[24]设计与TGFβ靶因子特异作用的反义寡核苷酸，在抗青光眼术后的动物模型中应用，发现术后疤痕明显减少，手术效果更好。国内也有学者报道TGFβ2反义寡核苷酸在动物眼的研究，结果相似[25]。目前进入临床和临床前期研究的抗TGFβ2反义寡核苷酸类药物（AP12009,AP11014等）均用于肿瘤治疗，尚无眼科临床应用的报道。该项技术在提高作用效率，减少副作用方面还有待进一步完善。
2.2阻止TGFβ与受体结合
2.2.1 TGFβ天然抑制剂核心蛋白多糖（decorin） Decorin是一种细胞外富含亮氨酸的小分子蛋白多糖，属于小分子间质性蛋白多糖家族成员。decorin广泛分布于哺乳动物的细胞外基质（ECM）中，能中和、灭活包括TGFβ在内的多种细胞因子，是TGFβ的天然抑制剂。研究表明decorin通过与TGFβ形成复合物，干扰TGFβ与相应受体结合形成TGFβ受体复合体启动其介导的信号通路，从而产生抗纤维化作用。decorin的核心蛋白能与TGFβ1，TGFβ2，TGFβ3各亚型相结合，中和其活性，是TGFβ活性的一种负反馈调节因子[26]。近年来decorin被证实具有较强的肿瘤生长负调节作用，成为抗肿瘤研究的热点，眼科领域的相关报道较少。2005年Grisanti等[27]报道在兔眼青光眼滤过手术前结膜下分别注射40～100mg decorin和安慰剂，术后14d组织学检查发现对照组出现大量纤维化，实验组只有很少的细胞外基质沉积。提示decorin结膜下注射可以有效减少兔眼青光眼滤过手术后的结膜疤痕。decorin为机体自身存在的物质，对TGFβ各亚型为非特异性抑制，此外还调节多种细胞因子的功能，其生物学功能还有待进一步研究明确。
2.2.2重组人源化TGFβ单克隆抗体 重组人源化TGFβ单克隆抗体是利用单克隆抗体具有的高度特异性和亲和力，与TGFβ形成抗原抗体复合物，中和其生物学作用。目前文献报道较多的是英国剑桥抗体技术公司开发的两种单克隆抗体。CAT192 (metelimumab)抗TGFβ1重组人源化单克隆抗体和CAT152（lerdelimumab）抗TGFβ2重组人源化单克隆抗体。TGFβ1在角膜细胞中表达较多。Carrington等[28]在创伤后牛角膜细胞研究中发现 CAT192能增加角膜上皮再生，减少上皮基质内植入。目前CAT192治疗硬化症的研究已经进入临床Ⅱ期[29]。
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