白内障             2410                                      PO0045

　　金雀异黄素对永生化人晶状体上皮细胞系HLEC-B3细胞增殖和细胞周期影响的研究

　　孔珺  刘芳　张劲松

　　中国医科大学附属四院眼科 100005
 
　　目的:研究金雀异黄素（genistein）抑制人类晶状体上皮细胞（human lens epithelial cells，HLEC）增殖的机制。

　　方法：流式细胞仪检测不同浓度金雀异黄素作用12、24、48、72h后对人晶状体上皮细胞周期及凋亡的影响。逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）方法检测细胞周期蛋白D1、P53及P21的Mrna表达；Western blot 法检测细胞周期蛋白D1和P53及P21的蛋白表达。

　　结果：流式细胞仪检测结果显示随Gen浓度的增大，S期细胞明显增多，细胞阻滞在S期。各浓度金雀异黄素作用12h、24h诱导凋亡不明显，处理48h后12.5mg/L浓度组出现凋亡峰，50.0mg/L浓度组凋亡明显。处理72h，6.25mg/L浓度组凋亡达12.72%，12.5mg/L浓度组凋亡达51.83%，25mg/L浓度组凋亡达59.3%。RT-PCR检测结果显示随金雀异黄素浓度逐渐增高，晶状体上皮细胞P21mRNA的表达逐渐下调，CyclinD1的Mrna表达水平上调，p53的Mrna表达水平一致。Western blot法检测结果：随Gen作用浓度增加P21蛋白表达逐渐减少，CyclinD1蛋白表达水平逐渐增高，P53蛋白表达处理组与对照组之间表达有显著差异（P<0.05），但各处理组间无显著差异。

　　结论：Genistein能够抑制HLEC的增殖，是细胞周期阻滞和细胞凋亡共同作用的结果，在诱导细胞凋亡前它使细胞阻滞在S期，机制可能与Gen引起P21的表达降低有关，而且这种降低是非依赖P53途径的。

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