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　　氯化钴诱发缺氧对人视网膜色素上皮细胞促红细胞生成素表达的影响

　　李爽 吴雅臻

　　吉林大学第二临床医院眼科  130041

　　目的:探讨促红细胞生成素(Erythropoietin，EPO)在人正常视网膜色素上皮细胞(Retinal Pigment Epithelium Cells，RPE)中以及氯化钴诱导的视网膜色素上皮细胞中促红细胞生成素的表达及其意义。

　　方法:利用体外培养的人RPE细胞，分别应用不同浓度氯化钴(Cobalt Chloride,CoCl2)造成RPE化学缺氧，应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测RPE细胞增殖，免疫荧光方法检测EPO表达，逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定EPO mRNA测量。

　　结果：MTT法检测细胞增殖，未加入氯化钴的hRPE细胞作为空白对照组，经50μmol/L，100μmol/L，150μmol/L,200mol/L,250μmol/L,500μmol/L,1000μmol/L浓度氯化钴处理4h作为实验组，测定光吸收值(A值)，在100μmol/L到500μmol/L浓度范围内，对照组与缺氧组A值均相差显著，分别为t=12.13,t=94.11,t=87.92,t=63.21,t=100.12,P均<0.01,而当浓度超过500μmol/L则细胞增殖明显被抑制，说明在氯化钴在一定浓度范围内，缺氧可明显促进RPE 细胞的增殖。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法及免疫荧光方法观察到，正常hRPE 细胞中有少量EPO表达，量-效关系：cocl2终浓度为125μmol/L时，hRPE 细胞中EPO表达明显增加，其后随浓度增加表达量稍有下降，cocl2终浓度为1000μmol/L，hRPE 细胞中EPO表达明显下降。时-效关系：cocl2（125μmol/L）作用4h时，hRPE 细胞中EPO表达明显增加，其后随作用时间增长表达量有所下降，cocl2（125μmol/L）作用8h时，hRPE 细胞中EPO表达明显下降。

　　结论：EPO在正常人RPE细胞中有少量表达，在缺氧刺激下EPO表达增强，推论它是RPE细胞的一种保护机制，可在缺氧所造成的视网膜色素上皮改变中起保护作用。

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