基础 585 PO0104
CTGF调节RPE细胞Ca2+信号传导通路
郭长梅,惠延年,王雨生,王静波,马吉献,胡丹
陕西西安 第四军医大学西京医院全军眼科研究所, 710032
【摘要】 目的 视网膜色素上皮(RPE)细胞在眼的代谢中起重要作用。结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)具有广泛的生物学作用,参与机体许多正常和病理状态下的功能活动。本实验观察RPE细胞在CTGF刺激时Ca2+信号变化情况,研究CTGF对RPE细胞内钙信号传导的作用。
方法 用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)测定CTGF及联合应用8-溴-cAMP(8-Br-cAMP)或地塞米松(DEX)对fluo-3/AM负载的RPE细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。
结果 CTGF可以剂量依赖性刺激RPE细胞内游离Ca2+浓度的升高,高峰值持续约40―60秒即迅速恢复到基线水平;20nM EGTA预处理RPE细胞30min后, rhCTGF(100ng/mL)刺激细胞,[Ca2+]i仅能轻度升高,进一步再加入12.5 mM Cacl2 至无钙环境中,可见rhCTGF诱导一个非常明显和持久的[Ca2+]i升高。DEX(10ug/mL)或8-Br-cAMP(10-4M)分别和rhCTGF一同处理细胞,可以明显抑制CTGF诱导的[Ca2+]i的升高,抑制率分别为51.06% 和50.02%。
结论 CTGF刺激RPE细胞内Ca2+信号传导通路,CTGF诱导的[Ca2+]i的升高涉及两种机制:细胞内钙库的释放和细胞外Ca2+的内流。8-Br-cAMP和DEX对CTGF诱导的[Ca2+]i的升高有抑制作用。
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