基础 2045 PO0141
TGF-β2对体外培养豚鼠巩膜成纤维细胞的影响
吕勇 谢坤鹏
郑州大学第一附属医院眼科 450052
目的 探讨豚鼠巩膜成纤维细胞(guinea pig scleral fibroblast,GSF)体外培养的方法,研究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对体外培养GSF的增生及胶原蛋白合成的影响,从而探讨TGF-β2与近视发生机制的关系。
方法 GSF原代培养,GSF鉴定,免疫组化检测MMP-2(matrix metalloproteinase-2)/TIMP-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2)的表达。取生长状态良好的3~6代GSF分别加入不同浓度的TGF-β2(0.01ng.ml-1~50.00ng.ml-1)。应用MTT法和氯胺T法分别观察比较GSF的增生时间、剂量效应关系、胶原蛋白合成情况及对MMP-2/TIMP-2表达的剂量效应关系。
结果 体外培养GSF正常情况下表达MMP-2/TIMP-2,TGF-β2能促进体外 GSF的增生(P<0.05),最佳作用浓度为10.00ng.ml-1。在0.10-50.00ng.ml-1浓度范围内促进胶原蛋白的合成,呈剂量依赖性(P<0.05)。TGF-β2 在1.00ng.ml-50.00ng.ml-1时上清液中MMP-2的含量降低(P<0.05),而TIMP-2的含量没有明显改变(P>0.05)。
结论 TGF-β2 能促进体外GSF的增生及胶原蛋白的合成。
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