角膜结膜及泪器病             1445                                      PO0260

　　羊膜可促进角膜缘干细胞的增殖

　　朱秀安1   杜仪琴1 曾惠阳1 陈静2 李凌松2

　　北京大学第三医院，北京大学眼科中心  100083

　　目的  证实羊膜能够促进培养的角膜缘干细胞的增殖而抑制其分化。

　　方法  将传代培养的第3代角膜缘干细胞分别传代于盖玻片上和保存人羊膜上，然后进行免疫荧光染色及RT-PCR检测p63、 connexin43、keratin 3、 keratin 12的表达情况。

　　结果  免疫荧光染色结果示羊膜上细胞p63阳性率明显高于盖玻片上细胞，而connexin43的表达则相反。盖玻片上细胞可见较多明显的p63-connexin43双阳细胞，而羊膜上细胞基本没有此类双阳细胞，多为p63单阳细胞。盖玻片上细胞少数表达keratin 3，而羊膜上细胞则基本为keratin 3阴性。RT-PCR结果证实培养皿中传代培养的第4代角膜缘干细胞既有p63的高表达，也有keratin 12的低表达；而角膜上皮细胞只有keratin 12的表达，而无p63的表达。

　　结论  羊膜可促进培养的角膜缘干细胞的增殖并抑制分化，使其保持干细胞的特性；p63不是角膜缘干细胞的特异标志，而是干细胞和短暂扩充细胞的标志，p63+/connexin43-为干细胞，p63+/connexin43+则为短暂扩充细胞。

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