角膜结膜及泪器病             2713                                      PO0345

　　成人结膜干细胞定位的免疫组织化学研究

　　洪晶  裴涌

　　北京大学第三医院，北京大学眼科中心  100083

　　目的：目前已知眼表面存在两类干细胞，即角膜上皮干细胞与结膜上皮干细胞。已经证实角膜上皮干细胞位于角膜缘部，但是关于结膜上皮干细胞的研究很少，结膜上皮干细胞确切的定位仍没有定论,本实验利用免疫组织化学方法确定成人结膜上皮细胞中的不同部位的表达情况推断成人结膜上皮干细胞的定位特征。

　　方法：获取角膜移植供者的睑球结膜组，连眼 睑取出完整睑球结膜，除去皮肤及皮下软 组织（睑缘保留），沿眼球矢状面剪取 球组织块（呈窄条状，包含全部睑结膜、 球结膜、穹隆部结膜及睑结膜与皮肤交接处），40g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋， 将组织蜡块制成3-5µm的切片，利用免疫组织化学方法对P63、PCNA细胞角蛋白K7、K14、K19、MUC5AC在不同细胞中的特异性表达进行观察。

　　结果：P63在近角膜缘球结膜上皮以及睑缘部的结膜上皮底层细胞的胞核阳性表达，表现为呈棕褐色着染；PCNA在近角膜缘球结膜上皮以及睑缘部结膜上皮的底层细胞的胞核阳性表达，表现为胞核呈棕褐色着染。K14在各部位结膜上皮的基底膜部均阳性表达；MUC5AC在各部位结膜上皮杯状细胞的细胞浆中呈淡棕黄色阳性着染；K7在穹隆部球结膜的固有层中的腺体中大量表达。

　　结论：结膜干细胞存在于近角膜缘部的球结膜上皮和睑缘部结膜上皮的底层细胞中。

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