2结果

　　2.1病理组织学观察 PDR的视网膜增殖膜中可见多量新生血管，多位于增殖膜周边部。增殖膜内还可见到较多的成纤维样细胞、数量不等的上皮样细胞及神经胶质细胞。PVR的视网膜增殖膜中可见数量不等的上皮样细胞、成纤维细胞样细胞、巨噬细胞和粒细胞，还可见胶原纤维等细胞外基质。正常视网膜细胞排列整齐，各层结构清晰完整。2.2 MMP-2和MMP-9的表达 MMP-2和MMP-9棕黄色阳性表达多数存在于细胞质中，呈散在的或聚集分布。增殖膜中的阳性细胞形态有3种：一部分呈多边形，部分细胞胞浆可见少量色素，胞核较大位于细胞中央；一部分细胞呈梭形，胞体较大，胞核为卵圆形，为成纤维样细胞：还有一部分细胞为新生血管内皮细胞(图1A，B)。PDR增殖膜细胞染色阳性率分别是70%和85%。PVR增殖膜细胞染色阳性率分别为80%和60%。正常视网膜标本MMP-2和MMP-9染色均为阴性。PDR视网膜增殖膜MMP-2和MMP-9表达的平均灰度值分别为150.64±0.63和149.69±0.78，PVR增值膜分别为150.54±0.44和151.07±0.90。PDR增殖膜与PVR增殖膜相比，MMP-2表达差别无统计学意义（P ＞0.05），MMP-9表达差别具有统计学意义（P ＜0.01），PDR增殖膜MMP-9表达高于PVR增殖膜。

　　图1 A,B PDR和PVR增殖膜内MMP-9的阳性表达 (SP×400)

　　3讨论

　　基质金属蛋白酶MMP-2和MMP-9能降解明胶、Ⅳ型胶原、Ｖ型胶原、Ⅶ型胶原、纤维连接蛋白和弹性蛋白[4], 在ECM降解和组织重建中起非常重要的作用。Webster等[5]发现，PVR的增殖膜MMP-2和MMP-9染色阳性，而在正常视网膜上仅见到MMP-1和TIMP-2染色阳性，这提示MMP-2和MMP-9在孔源性视网膜脱离增殖膜形成过程中发挥着重要作用。尽管PVR和PDR的发病机制和临床表现并不相同，但是两种疾病的视网膜增殖膜均以纤维增生，基质蛋白过度沉积和细胞浸润为特点。我们采用免疫组织化学方法检测PDR和PVR视网膜增殖膜MMP-2和MMP-9的表达，结果显示PDR增殖膜MMP-2和MMP-9表达阳性，正常视网膜表达阴性，说明PDR增殖膜有MMP-2和MMP-9表达的异常增加，提示可能与PDR增殖膜纤维化的发生密切相关。PDR和PVR增殖膜MMP-2和MMP-9表达相似，提示在视网膜血管性增殖和非血管性增殖过程中MMP-2和MMP-9参与ECM降解和沉积的分子机制可能是相同的。

　　与其它玻璃体视网膜病变相比较,PDR的一个重要特点在于新生血管形成。有研究表明，基底膜MMP-2和MMP-9与肿瘤新生血管形成有关，认为血管基底膜上的MMP-2和MMP-9表达,有助于降解基底膜中的ECM,使其结构疏松,一方面有利于ECM 降解产物向外渗漏介导胶质瘤细胞沿着基底膜侵袭；另一方面便于提供血管营养物质而有利于新生血管形成的重塑[3]。我们发现PDR增殖膜MMP-9的表达比PVR增殖膜高，且PDR增殖膜血管周围基质MMP-9表达阳性，说明MMP-9可能与PDR视网膜新生血管形成密切相关。MMP-9的作用为降解变性的胶原和Ⅳ型胶原，有利于内皮细胞的迁移,并为毛细血管网络增生提供了空间；基底膜和间质胶原的降解产物对内皮细胞有趋化作用,有利于内皮细胞的定向迁移。此外，PDR发生玻璃体积血患者的玻璃体腔内MMP-9表达水平显著升高[6]，也提示MMP-9可能与PDR视网膜新生血管形成密切相关。

　　总之，PDR增殖膜可见MMP-2和MMP-9表达，且与新生血管形成和纤维化相关。进一步的研究需要阐明血管周围MMP-9的沉积是否是PDR所独有的，或者是糖尿病所有微血管并发症的共有特点。在生理情况下,由于MMPs/TIMPs保持着调节平衡,可控制基质的过度沉着和瘢痕形成，保持组织的完整性。当MMPs或TIMPs产生过多时，可引起细胞外基质的过度降解或过多聚集及新生血管的形成。因此，对选择性MMPs产生的动力学研究和特异性TIMPs对其调节的研究，可以提供我们治疗和预防PDR和其他糖尿病微血管并发症的新方法。

　　【参考文献】

　　1 Mikael B, Erkki K. Gelatinase-mediated migration and invasion of cancer cells. Biochem Biophy Acta (BBA),2005;1755(1):37-69

　　2 Yang CQ, Zeisberg M, Mosterman B, Sudhakar A, Yerramalla U, Holthaus K, Xu L, Eng F, Afdhal N, Kalluri R. Liver fibrosis: Insights into migration of hepatic stellate cells in response to extracellular matrix and growth factors. Gastroenterology ,2003;124(1):147-159

　　3 Chantrain CF, Henriet P, Jodele S, Emonard H，Feron O，Courtoy P J，DeClerck YA，Marbaix E. Mechanisms of pericyte recruitment in tumour angiogenesis: A new role for metalloproteinases. Euro J Cancer ,2006;42(3):310-318

　　4冯树,宋今丹. 参与肿瘤侵袭和转移的细胞外基质降解酶.肿瘤防治研究,1999;29(1):72-74

　　5 Webster L, Chignell AH, Limb GA. Predominance of MMP-1 and MMP-2 in Epiretinal and Subretinal Membranes of Proliferative Vitreoretinopathy. Exp Eye Res ,1999;68(1):91-98

　　6 Descamps FJ, Martens E, Kangave D, Struyf S, Geboes K, Van Damme J, Opdenakker G, Abu El-Asrar AM. The activated form of gelatinase B/matrix metalloproteinase-9 is associated with diabetic vitreous hemorrhage. Exp Eye Res ,2006;83(2):401-407

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