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阿托品抑制大鼠泪液分泌的机制

http://www.cnophol.com 2009-7-24 10:05:53 中华眼科在线

  【摘要】  目的  研究阿托品抑制大鼠泪液分泌的机制,采用大鼠不同部位注射阿托品的方法,观察对泪液分泌的影响。方法  大鼠右耳前皮下和腹腔分别注射0.1ml的0.5mg/ml阿托品,在不同时间测定双眼的泪液分泌量。结果  右耳前皮下注射:右眼注射前、注射后1h、5h和8h的Schirmer试验结果分别为7.50±1.69、2.25±0.46、5.87±2.33和6.50±1.77mm,注射后1h显著低于注射前,左眼注射前、注射后1h、5h和8h的Schirmer试验结果分别为7.38±1.60、1.88±0.35、5.50±1.07和6.00±2.00mm,注射后1h显著低于注射前,两眼Schirmer试验结果间差异无显著性。腹腔注射:注射前、注射后0.5h、1h、2h、3h、5h和8h的Schirmer试验结果分别为5.67±1.03、2.50±1.05、2.83±0.75、3.67±0.82、4.50±1.05、5.00±3.16和4.67±1.63mm,注射后0.5和1h显著低于注射前。结论  阿托品抑制大鼠泪液的分泌主要通过血液吸收,再作用于泪腺,局部吸收起次要作用。

  【关键词】  阿托品;大鼠;干眼症;皮下注射;腹腔注射
   
  Mechanism of inhibiting rat tear secretion by atropine

  LIU Hong-wei,PENG Shu-ling.

  Department of Pharmacology,Beijing Institute of Ophthalmology,Beijing Tongren Ophthalmology Center,Beijing Tongren Hospital,Capital University of Medical Sciences,Beijing 100730,China

  【Abstract】  Objective  To study the mechanism of inhibiting tear secretion by atropine,the methods of different region of injecting atropine were performed and tear secretion was observed.Methods  Atropine (0.5mg/ml,0.1ml) was injected into rats hypoderma of right ears and abdomen.The amounts of tear secretion were measured.Results  In injecting hypodermal,the tear secretions of right eyes were 7.50±1.69,2.25±0.46,5.87±2.33 and 6.50±1.77mm before injection and at 1,5,8 hour,the tear secretions of left eyes were 7.38±1.60,1.88±0.35,5.50±1.07 and 6.00±2.00mm before injection and at 1,5,8 hour.The tear amounts at 1 hour were decreased than that before injecting significantly.There were no differences between two eyes.In injecting abdominal,the tear secretions were 5.67±1.03,2.50±1.05,2.83±0.75,3.67±0.82,4.50±1.05,5.00±3.16 and 4.67±1.63mm before injection and at 0.5,1,2,3,5,8 hour.The tear amounts at 0.5,1 hour were decreased than that before injection significantly.Conclusion  The mechanism of atropine inhibiting tear secretion were mainly via blood absorbing,then effecting lacrimal and secondly via local absorbing.

  【Key words】  atropine;rat;dry eye;injecting hypodermal;injecting abdominal

  泪腺受交感和副交感神经支配,血液中的激素和细胞因子也可对其作用。已发现泪腺细胞中有多种受体存在[1~7]。胆碱能受体的激动剂可促进泪腺细胞合成蛋白,并分泌蛋白、电解质和水到眼表[8],因此,阻断胆碱能受体的作用可减少泪液的分泌,家兔和小鼠的实验已证实[9~11]。笔者采用大鼠不同部位注射方法,研究阿托品抑制泪液分泌的机制。

  1  材料与方法

  1.1  动物  SD大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,体重100~150g,雌雄各半。

  1.2  泪液测定方法  将宽1.7mm的滤纸条放在大鼠上睑部,闭眼,测定2min的泪液分泌量。

  1.3  注射阿托品

  1.3.1  耳前皮下注射  8只大鼠右耳前注射0.1ml的阿托品(天津金耀氨基酸有限公司,批号:0409031,规格:0.5mg/ml),在不同时间测定双眼的泪液分泌量。

  1.3.2  腹腔注射  6只大鼠腹腔注射0.1ml的阿托品(同上),在不同时间测定双眼的泪液分泌量。

  1.4  统计学方法  数据以均数±标准差(x±s)表示,右眼与左眼相比为配对t检验,注射后与注射前相比为方差分析。

  2  结果

  2.1  耳前皮下注射  右耳前皮下注射阿托品,结果发现,两眼泪液分泌都减少,在注射后1h、5h和8h,右眼和左眼的泪液量差异无显著性。两眼在注射后1h都与注射前差异有显著性,见表1。

  表1  右耳前注射阿托品的Schirmer试验  (略)

  注:*与注射前相比差异有显著性(方差分析检验)

  2.2  腹腔注射  腹腔注射阿托品后,泪液量在注射后0.5h和1h下降,与注射前相比差异有显著性,2h开始恢复,8h恢复正常,见表2。

  表2  腹腔注射阿托品的泪液分泌  (略)

  注:*与注射前相比差异有显著性(P<0.05)

  3  讨论

  据报道,将阿托品注射入家兔眼下穹隆部,可使泪液分泌减少[9],小鼠尾部皮下注射东莨菪碱可造成干眼症模型[10],小鼠注射东莨菪碱加上对眼吹风,可造成眼表细胞凋亡[11],Sjogren综合征患者血液中有胆碱能受体的自身抗体[12],胆碱能受体阻断可造成干眼症。

  大鼠泪腺位于耳前皮下,我们注射阿托品至一侧泪腺,发现两眼泪液都减少,腹腔注射相同的剂量,得出同样的结果,选择在两耳间皮下注射,结果相同(另文发表)。因此,我们推断阿托品的作用是通过吸收入血,循环至泪腺而主要起作用。少量阿托品可能会扩散至泪腺并渗透入泪腺,进行家兔干眼症的实验中发现,阿托品局部点眼不能抑制泪液分泌,眼局部注射可抑制泪液分泌,我们使用墨汁将其分别注射入兔眼下穹隆部和颞部,1h后,泪腺被染色,接近注射点的颜色深。

  本文建立阿托品干眼症模型的目的,是为了一些药物直接或间接对泪腺的作用。角膜与泪腺存在反馈机制[13],有部分干眼症与泪腺功能低下有关,泪液分泌减少,使眼表得不到营养,加重眼表的病变,可造泪液分泌进一步减少,形成恶性循环。使用一些药物用来增加泪液分泌,阻断恶性循环,使泪液分泌正常。

  药物增加泪液分泌大部分可能通过眼表-泪腺反馈来起作用,通过胆碱能神经,也可通过肾上腺素神经或血管活性肠肽神经[14]起作用,或通过一氧化氮起作用[15]。因此,抑制胆碱能受体的作用,可以研究药物是否通过非胆碱途径并找出作用途径,有助于临床更好的治疗干眼症。

  【参考文献】

  1  Bradley ME,Peters CL,Lambert RW,et al. Subcellular distribution of muscarinic acetylcholine receptors in rat exorbital lacrimal gland. Invest Ophthalmol Vis Sci,1990,31:977-986.

  2  Chen LL,Johansson JK,Hodges RR,et al. Differential effects of the EGF family of growth factors on protein secretion,MAPK activation,and intracellular calcium concentration in rat lacrimal gland. Exp Eye Res,2005,80:379-389.

  3  Spelsberg H,Klueppel M,Reinhard T,et al. Detection of oestrogen receptors (ER) alpha and beta in conjunctiva,lacrimal gland,and tarsal plates. Eye,2004,18:729-733.

  4  Mauduit P,Herman G,Rossignol B. Protein secretion in lacrimal gland: alpha 1-beta-adrenergic synergism. Am J Physiol,1986,250:C704-712.

  5  Dartt DA,Baker AK,Vaillant C,et al. Vasoactive intestinal polypeptide stimulation of protein secretion from rat lacrimal gland acini. Am J Physiol,1984,247:G502-509.

  6  Rocha EM,Lima MH,Carvalho CR,et al. Characterization of the insulin-signaling pathway in lacrimal and salivary glands of rats. Curr Eye Res,2000,21:833-842.

  7  Cho ES,Kim SZ,Kim SH,et al. Natriuretic peptide system in the rat lacrimal gland. Exp Eye Res,2000,71:333-340.

  8  Herzog V,Sies H,Miller F. Exocytosis in secretory cells of rat lacrimal gland. Peroxidase release from lobules and isolated cells upon cholinergic stimulation. J Cell Biol,1976,70:692-706.

  9  Burgalassi S PL,Chetoni P,Saettone MF,et al. Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes. Ophthalmic Res,1999,31:229-235.

  10  Dursun D,Wang M,Monroy D,et al. A mouse model of keratoconjunctivitis sicca. Invest Ophthalmol Vis Sci,2002,43:632-638.

  11  Yeh S,Song XJ,Farley W,et al. Apoptosis of ocular surface cells in experimentally induced dry eye. Invest Ophthalmol Vis Sci,2003,44:124-129.

  12  Waterman SA,Gordon TP,Rischmueller M. Inhibitory effects of muscarinic receptor autoantibodies on parasympathetic neurotransmission in Sjogrens syndrome. Arthritis Rheum,2000,43:1647-1654.

  13  Mathers WD. Why the eye becomes dry: a cornea and lacrimal gland feedback model. Clao J,2000,26:159-165.

  14  Hussain M,Singh J. Is VIP the putative non-cholinergic,non-adrenergic neurotransmitter controlling protein secretion in rat lacrimal glands? Q J Exp Physiol,1988,73:135-138.

  15  Looms DK,Tritsaris K,Dissing S. Nitric oxide-induced signalling in rat lacrimal acinar cells. Acta Physiol Scand,2002,174:109-115.

  *基金项目:北京市科技计划项目课题(编号:Y0204002041331)

  作者单位: 100730 北京,首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 北京市眼科研究所药理室

(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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