我们用单管RTPCR法成功扩增了HSP8 mRNA及内参照 G3PDH mRNA。作为内参照的甘油醛3磷酸脱氢酶(G3PDH)是一种细胞内代谢酶，其基因属保守性强的“管家基因”，在动物体内具有普遍而恒定表达的特性，设立内参照的目的在于减少因RNA定量误差、加样误差以及各PCR反应体系中扩增效率不均一及各孔间的温度差等所造成的误差。将逆转录与PCR放在同一管、同一体系中进行，减少了反复加样造成的污染和人为误差。同时，由于逆转录产生的目的基因cDNA全部进入PCR反应，增加了反应的灵敏度。
HSP8基因，又叫hsc70，hsp73，位于染色体11q24.1，在若干生物体中均有构成性表达，在细胞应急和非应急条件下的蛋白质代谢中有重要的作用。HSP8是主要的伴侣蛋白(chaperoning)之一，其作用是与新生、未折叠、错折叠或聚集的蛋白质相结合, 使这些蛋白质或蛋白质聚集物解离, 加速正确的肽链折叠和重折叠; 维持某些肽链的伸展状态以利其跨膜转位, 在线粒体、内质网等不同的区域内发挥作用; 同时还促进某些变性蛋白的降解和清除; 重新激活某些酶的作用, 以维护细胞的功能和生存［13］。当机体受到刺激时, 热休克蛋白在自稳保护作用中主要是增强细胞对损害的抵抗及加速异常蛋白质的降解, 维持细胞的正常功能代谢, 提高细胞生存率。近年来，热休克蛋白在中枢神经系统中的作用及其潜在的应用价值的越来越受到重视。研究表明，在各种脑损伤时HSP8可以在中枢神经系统的胞质、核和内质网中表达［14］，以ATP依赖的形式与其他的蛋白质短暂的相互作用，维持神经元的正常生理结构和功能，在应激中发挥着重要的作用。在非应激状态下，热休克蛋白也是维持正常突触传递的重要因素，HSC70/CSP/SGT三聚体形成一个稳定的复合体, 位于突触囊泡的表面, 他们作为ATP依赖性的伴侣, 可激活已变性的底物, 调节突触间递质的释放, 参与神经突触的可塑性事件［15］。因此， hsc70对维护正常突触结构及功能有重要作用［16］。Moon等［17］用免疫组化的方法，发现HSP70在大脑皮质及海马的神经元细胞突触均有表达。另外，有研究表明，HSP8在生物老化过程中具有作用，已知哺乳动物对应激反应的年龄相关性改变是由HSP8所介导的，在大鼠各种组织中，随年龄老化，应激反应所引起的HSP70的表达显著性降低［18,19］。
本实验的结果表明，HSP8 mRNA在幼年及成年大鼠视皮层中均有表达，但在两组间表达水平有显著性差异，HSP8 mRNA在成年组大鼠视皮层中表达显著高于幼年组。证实了HSP8基因在视觉可塑性高峰期和终止期之间大鼠视皮层中的表达水平有显著性差异，HSP8基因在视觉可塑性关键期终止后的成年大鼠视皮层中呈高水平表达，提示HSP8基因的高水平表达与视觉可塑性关键期的终止密切相关，该基因是视觉可塑性关键期终止相关基因。究竟HSP8基因是通过何种途径参与视皮层视觉可塑性关键期的终止，还有待进一步进行深入研究。
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