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2.2 TGFβ1在翼状胬肉及其在正常球结膜中的表达 翼状胬肉中可见棕黄色颗粒广泛分布于上皮层、上皮下纤维层及血管内皮细胞胞浆中，以上皮层最显著（图3A）；表明TGFβ1在翼状胬肉中的明显表达。而在正常球结膜中可见少数上皮细胞呈淡棕黄色染色（图3B），提示TGFβ1有少量表达。经统计学分析，TGFβ1在翼状胬肉中阳性表达明显高于其在正常球结膜中的阳性表达，差异有显著性意义（z= 4.376，P<0.01）。
2.3 MMP2，TIMP2和TGFβ1表达的比较 MMP2和TGFβ1在翼状胬肉及其在正常球结膜中的表达，差异均有显著意义（P<0.01）。而TIMP2在两组中的表达差异无显著意义（P>0.05，表1）。经Spearman等级相关检验分析，在翼状胬肉组织中，MMP2和TGFβ1的阳性表达率存在正相关（r=0.686，P<0.01）；而MMP2和TGFβ1与TIMP2阳性表达率之间无相关（r=0.410，0.143，P>0.05）。
表1翼状胬肉及其在正常球结膜中MMP2，TIMP2和TGFβ1表达分布（略）
3讨论
翼状胬肉是一种常见的眼表疾病，手术是主要的治疗方式，但术后复发率较高。有关翼状胬肉发病机制众说纷纭如：免疫学机制、角膜缘干细胞移行机制、细胞调亡与增生异常机制及基质金属蛋白酶作用机制等。翼状胬肉是角膜缘干细胞起源的炎性增生[4]，其病理学特征主要为上皮层及基质浅层成纤维细胞增殖，同时伴有新生血管形成及炎性细胞浸润，以及球结膜上皮细胞的异常增殖[5]。超微结构研究表明，弹性纤维与胶原纤维的增生和变性及基质退变是翼状胬肉较为突出的病理改变[6]。
MMP2主要降解明胶、Ⅳ型胶原、Ⅴ型胶原和弹性蛋白。它是由结缔组织细胞以非活性酶原形式分泌，其活化取决于膜型基质降解酶（MTMMP）和TIMP形成的复合物[7]。当TIMP2过量时，就可减少细胞中游离的MTMMP含量，致使MMP2酶原无法活化；而当TIMP2量少时，导致细胞中游离的MTMMP增加，可使MMP2酶原活化增加。在生理条件下，MMP2和TIMP2之间保持动态平衡，但在某些病理条件下，MMP2与TIMP2的动态平衡被打破，将导致组织的破坏并致病。本实验研究表明，MMP2在翼状胬肉的上皮和上皮下基质均有表达，尤其在基底上皮细胞层呈强阳性表达。而在正常球结膜中未见MMP2的表达。这与Dushku等[8]的实验结果一致。TIMP2在翼状胬肉和在正常球结膜中的表达差异无显著意义，提示在翼状胬肉中MMP2和TIMP2的比例失衡。TIMP2量相对少，使MMP2酶原活化增加。而MMP2通过降解明胶、Ⅳ型胶原、Ⅴ型胶原和弹性蛋白，促进ECM的退变，从而改变了细胞赖以生存的微环境，导致细胞生长紊乱和弹性纤维、胶原纤维的异常增生。MMP2还可以促进血管周围的胶原酶活性并降解血管周围的基质，使血管内皮细胞沿着降解的基质向血管生成因子的方向移动，从而促进翼状胬肉新生血管形成。一旦MMP2和TIMP2之间的动态平衡被打破，MMP2异常分泌增加，而TIMP2不会随之增加，可使病变进一步发展。MMP2能裂解角膜前弹力层纤维原蛋白，导致上皮细胞尤其是变性的基底部角膜缘上皮细胞，突破Bowman膜[9]。Bowman膜是角膜上皮和基质层的自然屏障。一旦Bowman膜遭到破坏，翼状胬肉将向角膜侵犯和生长。因此，MMP2和TIMP2在翼状胬肉中的表达失衡，对翼状胬肉的发生、发展及侵犯角膜起着重要的作用。
转化生长因子β家族是一组调节细胞生长和分化的蛋白质家族。在哺乳动物中至少发现有4个：TGFβ1，TGFβ2，TGFβ3，TGFβ1β2，其中在眼表组织中以TGFβ1表达为主。TGFβ1在炎症、组织修复、胚胎发育、细胞生长、分化和免疫功能中都起重要的调节作用。它对间充质起源的细胞起激活作用，而对上皮或神经外胚层来源的细胞起抑制作用[10]。我们发现，在翼状胬肉上皮层、上皮下纤维层及血管内皮细胞胞浆中见的TGFβ1表达，以上皮层最显著。而在正常球结膜中极少数上皮细胞见的TGFβ1表达，两者阳性表达差异有显著意义。说明TGFβ1在翼状胬肉的发病过程中起着一定的作用。翼状胬肉常表现为慢性炎症反应，TGFβ1可趋化中性粒细胞到炎症反应部位，促使胞浆内游离的钙离子浓度升高及胞质的48kDa蛋白磷酸化。同时中性粒细胞可产生多种活性物质如氧自由基、白三烯和蛋白水解酶(如IL1、血小板原性生长因子，胶原酶，强性蛋白酶等)，从而导致弹性纤维及胶原纤维变性[11]。TGFβ1还能抑制ECM蛋白水解酶合成，从而抑制ECM分解，导致翼状胬肉中胶原纤维和弹性纤维异常增生和堆积。
翼状胬肉的发生是多因素参与复杂过程，各类因子之间形成一个复杂的网络来调节翼状胬肉的发生发展，每个因子不是孤立的发挥作用，而是同其他因子之间存在千丝万缕的联系。本研究结果显示MMP2和TGFβ1的阳性表达率呈正相关，而MMP2和TGFβ1与TIMP2阳性表达率之间无相关。Seomun等[12]的研究表明MMP2的过量表达仅由TGFβ1所诱导。而TGFβ1诱导的细胞与ECM之间的相互作用又是通过调节MMP2的转录来实现的[13]。因此，可以说在翼状胬肉的发生发展过程中MMP2和TGFβ1之间是相互促进、互为因果的。至于TIMP2不随MMP2和TGFβ1表达增加而增加，可能是由于TIMP2对MMP2的特异性抑制作用只是在某个范围内，当MMP2增加超过了最高限度时，两者的动态平衡将被打破，之后TIMP2不能随MMP2的增加而增加，造成细胞中游离的MTMMP增加，使MMP2酶原活化增加，进一步促进MMP2增加，引起ECM的退变和弹性纤维及胶原纤维的异常增生及新生血管的形成，最终导致翼状胬肉的发生发展并侵犯角膜。这些都有待于进一步研究。
【参考文献】
1李凤鸣.眼科全书.北京:人民卫生出版社 1997:13201321
2 Khasigov PZ，Podobed OV， Gracheva TS, et al. Role of matrix metalloproteinases and their inhibitors in tumor invasion and metastasis. Biochemistry2003;68(7):711717
3 Romowitz FB, Viola MV, Chao S, et al. Ras p21 expression in the progression of breast cancer. Hum Pathol1987;18(12):12681275
4 Guo LZ，Huan XY，Mei Z. Overexpression of type I growth factor receptors for pterygium. Chin Med J2002;115(3):418421
5 Lee JK, Kim JC. Progenitor cells in healing after pterygium excision. Yonsei MJ2007;48(1):4854
6 刘祖国.眼表疾病学.北京:人民卫生出版社 2003:354355
7唐维强,柳林.基质金属蛋白酶与角膜病变.国际眼科杂志 2004;4(1):120124
8 Dushku N, John MK, Sohultz GS, et al. Pterygia pathogenesis：corneal invasion by matrix metalloproteinase expression altered limbal epithelial hasal cells. Arch Ophthalmol2001;119(5):695706
9 Massaoutis P, Khenka S, Ayliffe W. Clinical outcome study of a modified surgical technique for pterygium excision. Can Ophthalmol2006;41(6):704708
10孙由芹,朱承华.转化生长因子β与翼状胬肉.国际眼科杂志 2006;6(3):661663
11 Yilmaz O, Dursun H, Gursan N, et al. Effects of the myeloperoxidase gene polymorphisms on development of atrophy in hpylori infected or noninfected gastroduodental disease. World Gastroenterol2007;13(8):12431246
12 Seomun Y, Kim J, Lee EH, et al. Overexpression of matrix metalloproteinase2 mediates phenotypic transformation of lens epithelial cells. Biochem2001;358:4148
13 Tamiya S, Wormstone IM, Marcantonio JM. Induction of matrix metalloproteinases 2 and 9 following stress to the lens. Exp Eye Res2000;71:591597 上一页 [1] [2] |
