表3  两组大鼠视网膜细胞溶解液吸光值的变化（略）

　　2.4  两组大鼠视网膜组织中Mg2＋含量变化  见表4。

　　表4  两组大鼠视网膜组织中Mg2＋含量变化（略）

　　2.5  两组大鼠视网膜组织中Ca2+含量变化  见表5。

　　表5  两组大鼠视网膜组织中Ca2+含量变化（略）

　　2.6  各指标间的相关分析  见表6。

　　表6  各指标间的相关分析（略）

　　3  讨论
   
　　凋亡（apoptosis）是多细胞有机体为调控机体发育，维护内环境稳定，由基因控制的细胞主动性死亡过程。研究发现［3］：细胞凋亡失常（过度或不足）参与许多疾病的发生与发展。近年来越来越多的研究证实［4,5］，视网膜微血管细胞凋亡在糖尿病视网膜病变中起着十分重要的作用。凋亡的生化基础是核酸内切酶被激活，引起DNA断裂，形成180～200bp为最小单位的单体或寡聚体片断。本实验通过酶联免疫分析法（ELISA）检测细胞浆内组蛋白伴随DNA片断（单核小体和寡核小体）的多少而了解糖尿病大鼠发病后不同时期视网膜细胞凋亡的程度，这种检测方法可用于细胞凋亡的定量分析。研究表明［6］，出现细胞凋亡需要一段时间过程，但凋亡机制一旦启动，常很快发生。本实验结果显示：糖尿病大鼠视网膜细胞溶解液中在发病后4周可测到细胞凋亡，且随糖尿病病程的延长凋亡程度逐渐加重；同时伴有视网膜组织内Ca2+离子浓度的增加、Mg2+离子浓度减少，其与对照组大鼠比较差异均有高度显著性。双变量相关分析表明，糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的程度与FBG浓度、HbA1c水平、视网膜内Ca2+离子含量及糖尿病病程高度正相关，而与视网膜内Mg2+离子含量高度负相关。说明糖尿病大鼠视网膜内细胞凋亡的发生及严重程度与机体内血糖和HbA1c水平的升高、视网膜组织内Ca2+离子含量增加、Mg2+离子含量降低及糖尿病病程的延长有关。
   
　　FBG和HbA1c是反映糖代谢控制好坏的客观指标，研究已证实［7］糖尿病病程的长短及糖代谢紊乱控制的好坏与糖尿病视网膜病变的发生发展密切相关。一些学者的研究也发现［8］，高糖环境可加速培养的牛眼视网膜周细胞凋亡，同时伴有细胞内Ca2+浓度的显著增加。本实验亦显示，在视网膜细胞凋亡的同时，视网膜组织中Ca2＋浓度明显增加，Mg2＋浓度则显著下降。Mg2+是激活和维持糖酵解过程中多个关键限速酶的主要辅助因子，糖尿病大鼠视网膜组织中Mg2+的异常下降必然影响视网膜组织的代谢机能，而导致或加速其视网膜病变的发生和发展。视网膜细胞内Ca2＋含量的增加，可致细胞体积的变化和视网膜电生理的异常。视网膜组织中离子的异常可干扰视网膜组织的代谢，而糖尿病累及视网膜是先有视网膜组织代谢的改变，然后才有组织学或检眼镜下所见的血管异常［9］。
   
　　总之，糖尿病大鼠视网膜组织中存在细胞凋亡，同时伴有视网膜组织中Ca2+、Mg2+离子浓度的异常。这些改变可能是糖尿病视网膜病变的病理基础之一。

　　【参考文献】

　　［1］ Kim J, Kim KS, Shinn JW, et al. The effect of antioxidants on glycated albumin-induced cytotoxicity in bovine retinal pericytes ［J］. Biochem Biophys Res Commun, 2002,292(4);1010-1016.

　　［2］ Fong DS. Changing time for the management of diabetic retinopathy ［J］. Surv Ophthalmol, 2002,47(Suppl 2):S238-S245.

　　［3］ Carson DA, Ribero JM. Apoptosis and disease ［J］. Lancet, 1993,341(8855):1251-1254.

　　［4］ Mizutani M, Kern TS, Lorenzi M, et al. Accelerated death of retinal microvascular cells in human and experimental diabetic retinopathy ［J］. J Clin Invest,1996,97(12):2883-2890.

　　［5］ Naruse K, Sakakibara F, Nakamura J, et al. Enhancement and inhibition of mitogenic action of insulin-like growth factor I by high glucose in cultured bovine retinal pericytes ［J］. Life Sci,1995,58(4)：267-276.

　　［6］ 朱理安，关瑞锦，胡锡衷.柯萨奇B3病毒引起心肌细胞调亡的初步探索［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2000，20(3)：210－213.

　　［7］ Masmiquel L, Segura RM, Mateo C, et al. Serum laminin as a marker of diabetic retinaopathy develoment: A 4-year follow-up study ［J］. Am J Ophthalmol, 2000,129(3):347-352.

　　［8］ Miwa K, Nakamura J, Hamada Y, et al. The role of polyol pathway in glucose-induced apoptosis of cultured retinal pericytes ［J］. Diabetes Res Clin Prac, 2003,60(1):1-9.

　　［9］ Frank RN. On the pathogenesis of diabetic retinopathy ［J］. Ophthalmology,1984,91(6)：626-634.

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