【摘要】  目的 探讨内源性神经生长因子（nerve growth factor，NGF）在准分子激光原位角膜磨镶术（laser in situ keratomileusis，LASIK）后干眼中的作用机制。

    方法 LASIK术前及术后1天、2天、10天及30天在17例患者（34眼）下睑结膜囊内抽取泪液标本，采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析法检测泪液中NGF含量，同时行泪膜稳定性的检查，并对两者行相关性分析。

    结果 NGF含量在术前平均值为（21.96±8.22）μg/ml，术后1天、2天、10天含量分别为(12.76±3.55)μg/ml、(11.01±4.66)μg/ml、(13.55±4.93)μg/ml，与术前比较差异有统计学意义（P<0.05）；术后30天含量(19.16±8.79)μg/ml，与术前比较差异无统计学意义(P>0.05)。术前泪膜破裂时间（breaking-up time，BUT）均值为(12.62±1.99)s，术后1天、2天、10天和30天分别为(4.68±1.77)s、(4.84±1.92)s、(7.36±1.53)s和(8.82±3.08)s，与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)；术后1天与2天比较差异无统计学意义(P>0.05)，术后1天（2天）、10天、30天比较差异均有统计学意义(P<0.05）。泪液中NGF含量与泪膜稳定性具有正相关（r=0.484，P<0.01）。

    结论 LASIK术后泪液NGF的含量存在一个由降低到正常的动态变化过程，NGF含量变化是泪膜稳定性下降的相关因素之一。

    【关键词】  准分子激光角膜切削术；神经生长因子；泪膜稳定性；干眼

    Relationship between the levels of nerve growth factor in tears and tear film stability after LASIK

    CAO Yu-jin，TANG Ren-hong.Department of Ophthalmology，The Third Hospital of Xiangya of Center South University，Changsha 410013，China

    ［Abstract］  Objective  To study the mechanism of endogenous nerve growth factor(NGF) in the dry eye after LASIK.Methods  Nerve growth factor levels in the tears of 34 eyes before and after LASIK were studied with a monoclonal antibody based ELISA before LASIK and 1 day，2 days，10 days，and 30 days after LASIK.Tear film stability was examined during the same visits.And then the relationship between the levels of NGF in tears and tear film stability in the eyes of pre and postoperative LASIK patients was studied.Results  Mean value of NGF before LASIK was (21.96±8.22)μg/ml and mean values at 1 day，2 days，10 days and 30 days after LASIK were(12.76±3.55)μg/ml，(11.01±4.66)μg/ml，(13.55±4.93)μg/ml，(19.16±8.79)μg/ml，respectively.The NGF levels in tears at the first three visits post-operation were significantly different from levels in the pre-operative group.(P<0.05).However，There was no significant difference between the pre-surgical level and the level at the 30 days visit post-operation(P>0.05).Tear film stability before LASIK was(12.62±1.99)seconds，and at 1 day，2 days，10 days and 30days after LASIK，it was(4.68±1.77) seconds，(4.84±1.92) seconds，(7.36±1.53)seconds，and (8.82±3.08)seconds，respectively.Tear film stability at the time of the four visits after surgery was significantly different from the preoperative level (P<0.05).There was a positive correlation between tear film content and changes in tear film stability after LASIK(r=0.484，P<0.01).Conclusion  The decrease of BUT is the cause of dry eye and the changes in tear film stability and the onset of dry eye after LASIK are related to the level of NGF.

    ［Key words］  LASIK;nerve growth factor;tear film stability;dry eye

    近年来，准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis，LASIK)成为屈光手术的主流手术。除了视力的上升，视觉质量以及舒适度也成为患者追求的目标。然而术后患者常常出现眼干涩、异物感、易疲劳等干眼症状，在一定程度上影响了视觉质量。有研究表明局部应用含神经生长因子（nerve growth factor，NGF）滴眼液可以改善LASIK术后患者的干眼症状。神经生长因子存在于角膜组织［1，2］，其含量的稳定性是维持正常角膜上皮完整和角膜感觉的重要因素。LASIK术后角膜NGF含量变化国内外文献鲜有报道。本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（avidin-biotin peroxidase complex enzyme-liked immunosorbent assay，ABC ELISA ）测定LASIK手术前后泪液中NGF水平的变化，结合泪膜稳定性检测，对NGF与干眼关系进行探讨。

    1  对象与方法

    1.1  对象选择  选取2006年9～11月在我院行LASIK手术患者17例（34眼），性别不限，年龄为18～32岁，平均（22.19±4.58）岁。术前等效球镜度数为（-3.65±1.90）DS。病例选取标准：（1）无角膜接触镜配戴史；（2）屈光度稳定2年以上；（3）没用过影响泪液分泌及泪膜稳定性的药物(抗青光眼药物、皮质类固醇药物等)；（4）术前经过裂隙灯及眼底检查，排除眼科其他疾病，如干眼（参照刘祖国干眼诊断标准［3］）、圆锥角膜、慢性泪囊炎、病毒性角膜炎活动期、青光眼、视网膜病变及视神经病变；（5）排除全身结缔组织疾病及自身免疫性疾病，如系统性类风湿关节炎、多发性硬化、严重的糖尿病及妊娠等；（6）近视度数不超过-10.00 D；（7）患者中央角膜厚度不低于500 μm。

    1.2  检查项目  常规检查裸眼视力、矫正视力、裂隙灯眼前节检查、角膜地形图、超声角膜测厚、眼压测量、散瞳查眼底、主客观验光等。

    1.3  泪膜稳定性测定（BUT）  荧光素钠滴入患者结膜囊后，在裂隙灯下用钴蓝滤光片观察一次瞬目到泪膜出现干斑所需要的时间。双眼分别测量3次取平均值。

    1.4  手术方法  手术采用120刀头行角膜瓣切削，角膜瓣蒂位于上方，切削厚度均为160 μm。

    1.5  术后用药  按常规术后用药。

    1.6  泪液标本收集  分别于术前和术后1天、2天、10天、30天收集泪液。表麻下将厚度为0.5 mm、直径3 mm圆形滤纸片（吸附体积约为6.5 μl）放入患者眼下穹隆部中外1/3结膜囊内，嘱其轻闭双眼。待滤纸片湿透达到充分饱和后取出，并立即放入EP试管内于-60 ℃冰箱内保存待检。全部病例均在相同条件下采集泪液作为样本。

    1.7  NGF水平的测定  采用ABC ELISA法。NGF检测盒(购自武汉博士德公司)，96孔聚苯乙烯酶标板(美国Nunc公司生产)，Thermolab systems multiskan MK3型酶联免疫检测仪。

    1.8  统计学分析  采用SPSS 13.0软件进行统计分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示；组间差异采用单因素方差分析；多个样本均数间的两两比较用LSD-t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

    2  结果

    LASIK手术前后泪液的NGF平均含量和BUT均值结果，见表1。LASIK术后1天、2天、10天泪液NGF平均含量较术前减少，差异有统计学意义（P<0.05）；术后30天NGF含量与术前比较差异无统计学意义（P>0.05）。LASIK术后各时间点BUT与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05)；术后1天与术后2天比较差异无统计学意义(P>0.05)；术后1天（2天）、10天、30天比较差异均有显著性(P<0.05)。表1  LASIK手术前后NGF平均含量和 BUT均值 注：与术前平均含量比较，*P<0.05

    LASIK手术前后泪液NGF含量与相应的BUT值进行Pearson直线相关性分析显示，两者呈正相关(r=0.484，P<0.01)。

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