3   讨   论

    本实验所得正常RGCs平均密度为(1970 ± 82)/mm2，视神经切断后5、7、14 d时RGCs存活率分别为50%、40%、11% ，结果与以往的报道基本相似[11]。端切断成年哺乳动物的视神经可导致RGCs在短期内大量死亡[1]，探讨RGCs死亡原因并提出有效的防治措施是神经生物学研究的重要课题。Ca2＋是神经细胞内重要的信息物质，大量研究表明，胞内Ca2＋超载可导致神经元的死亡，而降低胞内Ca2＋浓度的措施可促进受损神经元的存活[5,12]。

    近来有研究提示，中药对中枢神经系统受损神经元的存活有保护作用[13,14]，其中传统中药三七的神经保护作用很受关注[15-17]。tPNS是五加科人参属植物三七的主要有效成分,是一种受体操纵Ca2+通道阻断剂,具有扩张血管，清除自由基,抗炎,抗氧化等药理作用[6-8]。本课题组以往的研究表明，腹腔注射tPNS可以促进视神经切断后RGCs的存活，5 d、7 d、14 d时RGCs存活率分别提高了13%、12%、5% [9]。但腹腔注射的tPNS通过血液循环到达损伤局部才能发挥作用，影响因素较多，不利于对其机制的探讨。本实验选择玻璃体腔内局部注射的方式，便于tPNS直接作用于受损RGCs，促使其有效发挥保护作用,也便于以后对其作用机制的研究。

    本实验结果表明玻璃体注射tPNS对视神经切断后RGCs的存活有保护作用。与未注射组相比，在视神经切断后5、7、14 d的节细胞存活率分别提高了19%、19%、 13%。其作用在切断后5 d、7 d较14 d时显著。与腹腔注射tPNS对RGCs存活的作用相比，玻璃体注射tPNS在各个时间点均有优势。

    本实验结果还表明，tPNS对受损RGCs的保护作用呈现剂量依赖性，有最佳作用浓度，与人参皂苷有相似性[13]。这可能与其抑制Ca2+内流的机制有关，因为只有合适的胞内Ca2+浓度才能对细胞的生存起促进作用，但确切机制尚需进一步研究。在视神经切断后两周内，tPNS提高受损RGCs存活率的效果显著，提示其短期内对受损神经元有保护作用，其长期作用情况将在下一步实验中进行探讨。

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