作者：苏颖 王峰　哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科

　　目的：观察活化的巨噬细胞在体内对视神经损伤后，视网膜神经节细胞轴突生长及巨噬细胞条件培养基对体外培养成年大鼠视网膜神经节细胞轴突生长的影响，评价活化的巨噬细胞对视神经损伤后修复的影响。

　　方法：成年Wistar大鼠按损伤后存活时间不同分组，每只大鼠右眼为实验组，接受玻璃体内注射酵母多糖，左眼作为对照组，接受玻璃体内注射磷酸盐缓冲液。制备视网膜、视神经冰冻切片，采用免疫荧光技术检测视网膜神经节细胞中生长相关蛋白-43、ED-1的表达以及视神经中生长相关蛋白-43的表达。加入巨噬细胞条件培养基培养视网膜神经节细胞。用Thy1.1抗体染色，采用图象分析系统计算细胞轴突长度。

　　结果：对照组中未见ED-1阳性巨噬细胞，实验组中在视网膜的内表面和玻璃体中可见ED-1阳性巨噬细胞。视网膜中GAP-43表达：实验组中可见视网膜中GAP-43的表达，对照组仅见少量GAP-43的表达。实验组和对照组不同时间视网膜阳性细胞染色面积均有显著差异（F=23.64,13.98，P＜0.01），均在伤后3天GAP-43表达最多，以后逐渐下降。视神经中GAP-43表达：对照组中表达少量GAP-43，实验组中可见视神经中轴突显示GAP-43表达，GAP-43表达阳性轴突沿视神经生长。实验组和对照组不同时间视神经阳性细胞染色面积均有显著差异（F=49.21，36.90；P＜0.01)，均在伤后3天GAP-43表达最多，以后逐渐下降。Thy1.1抗体染色可见着色在RGCs细胞膜和轴突。实验组3天有较长轴突生长，对照组3天有较短轴突生长。RGCs于培养1天、3天及7天，经自动图像分析系统处理，得出细胞突起长度。实验组及对照组培养不同时间RGCs突起长度不同，差异有极显著性（F=42.84，32.18； P＜0.01)。

　　结论：玻璃体内注射酵母多糖可激活巨噬细胞，激活巨噬细胞可以促进视神经损伤后视网膜神经节细胞轴突的生长。我们成功建立RGCs体外培养体系，并使较长期的纯化培养成为可能。巨噬细胞条件培养基可促进体外培养的视网膜神经节细胞轴突的生长，与对照组相比有显著差异。