谭健

复旦大学附属眼耳鼻喉科医院   200031

目的：研究视网膜色素上皮细胞（Retina pigment epithelial，RPE）氧化性损伤过程中酸敏感离子通道1a（Acid-sensing ion channel 1a，ASIC1a）的作用。

方法：以人视网膜色素上皮细胞株（ARPE-19）为研究对象，以100mM过氧化氢（Hydrogen peroxide，H2O2）处理不同时间建立氧化性损伤模型。应用MTT法检测细胞损伤情况，实时荧光定量RT-PCR以及Westernblot分别检测ASIC1a在RPE中的表达变化；同时采用ASIC抑制剂amiloride，检测对ARPE-19的氧化性损伤过程的影响。

结果：H2O2对ARPE-19的损伤作用呈时间依赖性，在15min细胞损伤率约为24%，在2h细胞损伤率>90%，随着时间延长至4h，细胞损伤率没有进一步降低。实时荧光定量RT-PCR检测发现在ARPE-19中有ASIC1a mRNA表达，但在H2O2损伤过程中没有明显变化。而Westernblot检测显示，ASIC1a的蛋白表达在处理初期（30min）即开始有明显升高并在损伤2h进一步增高。ASIC的抑制剂amiloride预处理细胞，能够明显降低H2O2对ARPE-19的损伤作用（P<0.05）。

结论：ASIC1a在RPE中有表达，并且参与了RPE的氧化性损伤过程。