王大博
青岛大学医学院附属医院 266003
目的:评价体外培养的大鼠视网膜神经元(RNs)和Müller细胞中热休克蛋白27(HSP27)的诱导表达,及其对谷氨酸损伤的视网膜神经元的保护作用。
方法:大鼠RNs和Müller细胞体外培养体系分别经过热休克处理(42℃下1h),免疫细胞化学法检测HSP27表达的时间经过,并进行计算机图像分析;对RNs进行谷氨酸(100μmol/L,作用6h)兴奋毒性损伤,四唑盐(MTT)比色法评价细胞存活能力,同时用HSP27抗体阻断其表达。
结果:热休克处理后大鼠RNs和Müller细胞中HSP27高效表达,分别在热休克处理后2h,6~12h达到高峰;经热休克预处理,RNs在谷氨酸盐损伤后的细胞活力明显提高,该现象可被HSP27抗体阻断。
结论:热休克能够诱导RNs和Müller细胞高效表达HSP27,从而增强RNs对谷氨酸兴奋毒性损伤的耐受能力。HSP27抗体可以减低体外培养的视网膜神经元的细胞活力,并可以部分阻断热休克预处理对谷氨酸兴奋性损伤的保护作用。
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