张朝霞 王雨生 张楚 石圆圆 侯慧媛 蔡岩 朱洁 赵玮 窦国睿 惠延年
第四军医大学西京医院眼科 710032
目的:研究缺氧因素在基质细胞衍生因子-1(SDF-1)介导骨髓来源细胞(BMCs)参与脉络膜新生血管(CNV)形成中的作用。
方法:通过将GFP+/+转基因小鼠全骨髓细胞移植给野生C57BL/6J小鼠建立C57BL/6J-GFP嵌合体小鼠,用532nm激光建立小鼠CNV模型,通过冰冻切片免疫荧光染色观察CNV局部缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和SDF-1的表达趋势变化及CXCR4+骨髓来源细胞聚集情况;利用体外培养的RPE细胞,观察缺氧条件下,RPE细胞HIF-1α和SDF-1表达情况;运用小干扰RNA(siRNA)技术构建HIF-1α低表达的RPE细胞,观察缺氧状态下HIF-1α对SDF-1表达的影响。
结果:免疫荧光染色显示CNV局部HIF-1α表达渐高,于24h达峰值,且SDF-1表达随之升高,并于3d达峰值,均位于近光斑损伤的RPE层。缺氧诱导体外培养RPE细胞HIF-1α及SDF-1表达增高,于4h达峰值;shHIF-1α抑制HIF-1α并下调SDF-1表达。免疫荧光染色显示损伤局部聚集的BMCs均为CXCR4阳性,于SDF-1达峰值时渗出数量最多,进而分化参与新生血管形成。
结论:在CNV形成过程中,缺氧诱导RPE层HIF-1α表达增高,上调SDF-1表达,趋化CXCR4阳性BMCs细胞聚集于CNV局部,参与新生血管形成。 |