张晓光 韩泉洪 惠延年 侯旭 马吉献
西安第四军医大学 西京医院 眼科 天津眼科医院 网脱科 710032
目的:①观察培养hRPE在牵拉力模型中细胞骨架的改变,以了解这种细胞在原发性RD形成早期细胞骨架的变化;②观察培养hRPE在受力模型中IL-8和MCP-1的表达、合成和分泌,以模拟和了解这两种炎性因子可能在原发性视网膜脱离形成早期的作用。
方法:采用免疫荧光双标观察RPE细胞骨架在垂直方向力作用下的改变,并用RT-PCR、免疫荧光双标及ELISA等方法测定RPE细胞在力作用下MCP-1和IL-8的表达、合成和分泌。
结果:(1)力作用1h时,hRPE细胞骨架的空间结构发生变化,4h后hRPE 的形态发生改变,极性发生变化,actin聚集形成微丝,actin 和vimentin微丝排列与受力方向一致。骨架微丝表达主要位于胞核周及磁珠聚集处周围。而加入细胞松弛素D(CD)预处理的细胞在8h时发生以上变化。(2)力作用下,MCP-1及IL-8的表达及合成有两个峰值,30min内开始升高,而在4h左右时再次升高,合成MCP-1和IL-8荧光亮度随时间的变化而变化出现两个峰值。CD预处理后两种因子的表达、合成和分泌量均下降。
结论:牵拉力可以引起hRPE细胞骨架分布的改变,诱导细胞表达MCP-1和IL-8,提示这两种炎性细胞趋化因子可能参与了RD起始阶段的炎症反应过程,使其表现出肌细胞某些生物学特点,进一步促进细胞的移行和增生。 |