樊嘉雯 徐格致
复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 200031
目的：研究低氧诱导因子-1a(HIF-1a)在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中的作用及机制，探求缺血-再灌注损伤中视网膜神经保护的新方法。
方法：将SD大鼠随机分组，钳夹视神经鞘夹闭视网膜中央动脉30秒后去夹闭，造成视网膜急性缺血-再灌注损伤模型。钳夹后2、4、8、12、24、48小时取大鼠视网膜，荧光TUNEL标记凋亡的神经元，real-time PCR及Western Blot检测HIF-1a及其调控靶基因产物HO-1、P53及VEGF的表达，进一步检测视网膜超氧化物歧化酶-1(SOD-1)及抗凋亡基因Bcl-2的表达，GFAP标记激活的Müller细胞。
结果：缺血-再灌注损伤后，视网膜神经元的凋亡数量明显增多，24h达峰值，峰值后显著下降。HIF-1a的蛋白量呈现一个先高后低的趋势，损伤后12h达峰值，表达主要分布于神经节细胞层、神经纤维层和内核层;其下游调控基因产物 HO-1、P53、VEGF的表达量均在损伤后升高，分别于8h、24h、12h达峰值，峰值后下降。与此对应，损伤后SOD-1及Bcl-2的表达即出现显著下降，SOD-1表达变化与HO-1趋于一致;Bcl-2表达变化与P53趋于相反。损伤后GFAP表达增多，12h达峰值，提示Müller细胞的激活。
结论：缺血-再灌注损伤后同时启动氧化应激反应和凋亡程序，对视网膜神经元和神经胶质细胞造成损伤，HIF-1a在这一过程中起了重要的调控作用，损伤同时启动靶基因HO-1、P53、VEGF等，其中保护因子HO-1的激活缓解了氧化损伤并且抗凋亡。Müller细胞的胶质激活参与了这一过程的调节。 |
