【真菌的检查方法】
　　　　1. 不染色法：10%~20%氢氧化钾湿片法
　　　　（1）原理：利用氢氧化钾溶解刮片中的非真菌杂质而显示菌丝。
　　　　（2）检查方法：将刮取的角膜组织或活检组织，放在清洁的载玻片上，滴加10%~20%氢氧化钾1~2滴，覆以盖玻片。在弱火焰上微微加温，使杂质溶化清晰，先用低倍镜找到标本位置，再用高倍镜或油镜观察菌丝和孢子。若同时加入亮绿或甲基绿能增加对比度。
　　　　（3）结果分析：该法实用、简单快速，能在镜下见到不同种菌丝形态，有的能见到孢子。缺点为易出现假阳性或假阴性。
　　　　2．染色法：
　　　　（1） 姬姆萨（Giemsa）染色：
　　　　　　染液为Giemsa染液，临用前原液与工作液1:20混合，制备成应用液。
　　　　①检查方法：刮片方法见第一章，甲醇固定。
　　　　②染色：Giemsa工作液染20分钟，倾去，水洗、待检。
　　　　③结果分析：丝状真菌、类酵母菌染为紫或红色，核蓝紫色、紫红色，胞壁、中隔及死亡菌丝不着染，背景为粉红或淡蓝色。
　　
　　　　　　　　　　　　
　　　　（2） Gram染色
　　　　①检查方法：刮片方法同上。
　　　　②染液和染色步骤：见第一章。
　　　　③结果分析：丝状真菌因菌龄不同，其内容物不同，着染为紫蓝色、红色，细胞壁及中隔不着染，衰老或死亡菌丝呈玻璃样。念珠菌等芽生细胞及假菌丝染为紫兰色。
　　　　（3）荧光染色法
　　　　所用荧光染料有吖叮橙和钙荧光白（Calcofluor white CFW）。CFW是一种二苯乙烯类的荧光增白剂，能与真菌细胞壁的纤维及几丁质发生特异性的结合，荧光显微镜下可快速检出真菌，尤其是真菌生长旺盛部位如菌丝顶端，酵母芽孢等。荧光显微镜下丝状真菌细胞壁呈亮绿色，核绿色。类酵母菌、假菌丝、厚膜孢子呈红橙色。
　　　　（4） 过碘酸雪夫氏（periodic acid—schiff，PAS）染色丝状真菌、类酵母菌染为红色。
　　　　（5）果莫里六胺银（Gomori`s methenamine silver，GMS）染色法
　　　　用铬酸氧化真菌多糖为醛，还原六亚甲基四胺银成为可见的金属银。丝状真菌细胞壁及中隔染为黑色，酵母、类酵母菌染为黑色。背景淡绿色，对比明显，显微镜低倍镜下即可见。
　　　　PAS 和 GMS这两种染色法不但在病理切片中显示真菌效果卓越，且许多作者认为在角膜刮片中显示真菌具有特异性高、易辨认之优点。缺点是需特殊化学试剂及费时较长。

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