摘要:观察灯盏花提取成分(DSX)对持续性高眼压大鼠眼压及视网膜基因表达的影响。方法 (1)将SD大鼠分为3组,空白组不造模,模型组和治疗组用Akira法造模。(2)测定三组大鼠在术后即刻、术后第1天、术后每7天的眼压,至术后1个月。(3)处死大鼠,提取视网膜的totalRNA,制作成芯片并分析。结果 (1)术前3天大鼠的平均眼压为(13.44±1.50)mm Hg,术后即刻眼压平均升高147%,术后1个月,模型组平均眼压是术前的1.99倍,实验组眼压与空白组基本相同。(2)与空白组比较,模型组有1个与细胞凋亡相关的基因NGFR表达上调,与模型组比较,实验组的NGFR表达下调。CRYGD、CRYBB3、CRYBB2表达上调。结论 DSX对持续性高眼压大鼠视网膜有保护作用。
青光眼(glaucoma)是指与眼压升高有关的以视网膜神经纤维萎缩、视盘凹陷和视野缺损为主要特征的一组疾病,为临床常见的继白内障之后的第二位致盲性眼病。灯盏花提取成分(DSX)是从中药灯盏花中提取的有效成分。目前已证明灯盏花具有活血化瘀、通窍明目的作用,能保护高眼压状态下的RGCs免受或少受损伤并挽救凋亡细胞[1],在此基础上,我们进行了进一步的研究,现总结资料如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物 8~12周龄SD大鼠,体重约150~200 g。均符合一级动物标准。饲料为全价鼠颗粒饲料。SD大鼠及饲料均由成都中医药大学实验动物中心提供(生产合格证:川实动管质第99-11号)。饲养室温10 ℃~15 ℃,相对湿度55%~75%,12 h光照维持,自由摄食饮水。纳入标准:(1)无外眼部疾病。(2)双眼瞳孔直接对光反射和间接对光反射正常。
1.2 主要试剂 戊巴比妥钠(上海化学试剂厂分装)、1%地卡因(成都中医药大学附属医院制剂室)、0.25%氯霉素眼液(长春迪瑞制药有限公司)、RNAlater(QIAGEN公司)、EDTA-Na2(国药集团化学试剂有限公司)NucleoSpin RNA clean-up试剂盒(MACHEREY-NAGEL,Germany)等。DSX由中药灯盏花提取制成。
1.3 主要仪器 电子秤(上海天平仪器厂)、电子天平(上海天平仪器厂)、眼科显微手术器械(苏州医疗器械厂)、眼科手术显微镜(苏州医疗器械设备厂)、TONO-PEN笔式眼压计(美国Medtronic solan 公司)、眼科手术止血器(大连山木医疗器械厂)、大鼠Oligo芯片、LuxScan10KA双通道激光扫描仪(CapitalBio公司)等。
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