2  结果

　　2.1  角膜细胞Fas蛋白及FasL蛋白全为细胞质和（或）细胞膜着色  35例角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白均呈阳性表达。角膜上皮细胞及内皮细胞FasL蛋白均呈阳性表达，而角膜基质细胞则无FasL蛋白表达。新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas、FasL蛋白阳性表达量经统计学分析差异无显著性。

　　2.2  细胞凋亡检测结果

　　2.2.1  凋亡细胞特征  发生凋亡的细胞皱缩，核的改变最明显，典型的染色质断裂、分离、浓缩形成密集颗粒，聚集于核被膜下呈新月形或帽状。继续发展可出现凋亡小体，其特点是具备完整的膜状结构，胞膜表面微绒毛消失，内容物除了胞质以外，主要含有降解的染色质片段。本实验采用Tunel方法检测，DAB作为显色底物，显微镜下观察，细胞核含有棕黄色颗粒的细胞即为阳性细胞。

　　2.2.2  深低温保存与角膜细胞凋亡的关系  本实验结果发现，所有阴性对照组均未见Tunel阳性细胞；阳性对照组可见大量Tunel阳性细胞。新鲜角膜仅在上皮层偶发现少许凋亡细胞，经冷冻保存后，凋亡细胞显著增加，上皮、基质和内皮细胞层均可见到凋亡细胞。见表1。

　　表1  新鲜角膜及冷冻保存后凋亡细胞情况（略）

　　由表1可见，深低温冷冻保存后角膜的凋亡细胞数量明显较新鲜角膜增加，二者差异有显著性（P＜0.05），冷冻-复温损伤与细胞凋亡可能有关。

　　2.3  角膜移植免疫排斥反应发生与角膜的新鲜程度有关  新鲜角膜部分穿透性角膜移植术后6～12个月的免疫排斥反应发生率为12%（3/25），深低温保存角膜移植后6～12个月的免疫排斥反应发生率为10%（1/10），二者差异无显著性（P＞0.05）。

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