表1 微波辐照后SOD,GSH-Px活性与MDA的含量
tab 1 SOD and GSH-Px activity and MDA content in cells after exposure to microwave
(n=4, X±s)
Group |
SOD
(μU/cell) |
MDA
(fmol/cell) |
z(GSH-Px)
/nmol·s-1 |
Control |
0.91±0.06 |
35± 8 |
525±80 |
10 mW/cm2 |
0.73±0.13a |
96±12b |
427±65a |
30 mW/cm2 |
0.39±0.09b |
185± 9b |
338±68b |
60 mW/cm2 |
0.19±0.07b |
272±21b |
165±73b |
aP<0.05, bP<0.01 vs control.2.3 Na2SeO3的防护作用 在培养液中加入Na2SeO3后辐照,0.1μmol/L 即有明显的抗氧化作用,使细胞内SOD, GSH-Px活性较60 mW/cm2组明显升高(P<0.05, tab 2),MDA显著下降(P<0.05),1 μmol/L组和10 μmol/L组在抗氧化能力方面明显优于0.1μmol/L 组(P<0.05),但这两组间却无显著性差异.
表2 Na2SeO3对微波致视网膜神经细胞损伤的防护作用
tab 2 Na2SeO3 protective effects on nerve cell damage of pig retina induced by microwave
(n=4, X±s)
Group |
SOD
(μU/cell) |
MDA
(fmol/cell) |
z(GSH-Px)
/nmol·s-1 |
60 mW/cm2 |
0.19±0.06 |
272±21 |
165± 73 |
0.1 μmol/L |
0.27±0.03a |
184± 9a |
397±112a |
1 μmol/L |
0.38±0.03a |
124±12b |
672±135b |
10 μmol/L |
0.40±0.08a |
115±11b |
838±122b |
aP<0.05, bP<0.01 vs control.2.4 细胞内Se水平 视网膜神经细胞内硒浓度为(24±3) fg/细胞,微波辐照后为(25±3) fg/细胞,辐照未引起细胞内硒浓度的变化. na2SeO3可透过细胞膜进入细胞内部,使细胞内硒浓度增加.0.1 μmol/L组细胞内Se浓度达(34±2) fg/细胞,高于对照组(P<0.05),1 μmol/L 和10 μmol/L组细胞内Se浓度分别为(101±13) fg/细胞和(174±10) fg/细胞,升高更明显(P<0.01),其变化程度与培养液中Na2SeO3浓度的对数值呈正相关(r=0.99, p<0.05).
3 讨论
微波对视觉功能的影响主要涉及晶体、视网膜和角膜,目前研究较多的是对晶体的损伤,而有关视网膜损伤的报道较少,且多为组织病理学损伤[5,6],致伤机理多认为是由于微波的热效应引起.本实验10 mW/cm2组与对照组比较,温度无明显变化,但脂质过氧化指标明显改变,30 mW/cm2组与60 mW/cm2组经照射后温度明显高于对照组,脂质过氧化反应更明显.可见,低强度微波辐照可能存在非热效应,而高强度辐照可能是热效应和非热效应的联合作用.研究表明,体内一些正常的生理过程涉及自由基的作用,这些自由基在体内清除系统作用下,可及时得到清除,使体内自由基的产生和清除达到动态平衡,但某种因素作用于机体,破坏了这种平衡,体内就会产生过多的自由基,这些活性基团通过一系列的化学反应引发组织损伤.本实验10 mW/cm2微波辐照后,即可引起细胞内SOD与GSH-Px活性明显降低,MDA含量显著升高,随着微波强度的增大,SOD与GSH-Px活性下降程度越大,MDA含量升高越明显.细胞脂质过氧化损伤程度随微波辐照强度增大而增加.视网膜各层细胞内均有清除自由基的天然保护系统,包括抗过氧化物酶系统和天然的抗氧化剂,但视网膜对微波损害又具有敏感性.光感受器外段含大量长链不饱和脂肪酸,这些长链不饱和脂肪酸具有易受自由基攻击的亚甲基结构,对过氧化反应极为敏感,易与OH·反应形成脂质自由基,并攻击其它不饱和脂肪酸引起连续反应.光感受细胞内段富含线粒体,对氧的需要很大,使光感受细胞外段处于一高张氧环境,在微波作用下,可能使核膜、盘膜、线粒体膜和内脂网的脂质发生过氧化,导致膜中蛋白质酶和磷脂交联失活,使膜的流动性和通透性改变而受到不可逆的损伤.
硒作为谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)的活性中心元素,其抗脂质过氧化作用已为人们共识.一般认为,硒在体内主要通过谷胱甘肽过氧化物酶发挥生物学作用.但有人证明硒的化合物具有直接清除自由基的作用,且硒化合物清除脂质过氧化自由基的作用随脂质中不饱和脂肪酸双键数目增多而加强,可能是通过硒中心自由基进行.研究表明,微量亚硒酸钠与晶体上皮细胞孵育可减轻羟自由基对细胞的DNA损伤,提高细胞的抗氧化能力[7].本实验研究表明,亚硒酸钠孵育后,未引起培养液温度的变化,但可以透过细胞膜进入细胞内部,增加细胞内硒浓度,其程度与培养液中Na2SeO3浓度的对数值呈正相关(r=0.99, p<0.05). 亚硒酸钠孵育还可使细胞内SOD, GSH-Px活性升高,MDA含量下降,提高细胞的抗氧化能力,在一定程度上清除自由基,对微波辐照损伤具有一定的防护作用.
作者简介:刘学东,男,1971-07-19生,河北省涿州市人,汉族.1994年西安医科大学毕业,硕士生,发表论文2篇. 导师龚书明.电话:(029)3374866
作者单位:刘学东 龚书明 杨瑞华 邓中荣 陈景元 第四军医大学:军事卫勤统计系军队卫生学教研室,陕西西安 710033郭守一 第四军医大学:空军医学系航空临床医学教研室,陕西西安 710033
参考文献
1 Takahashi N, Cummins D, Caprioli J. Rat retinal ganglion cells in culture. Exp Eye Res, 1991;53(5):565-572
2 王成莲. 羟胺法超氧化物歧化酶测定.生物化学与生物物理学报, 1989;16(6):473-475
3 张秀明,严丽娟,柴建开et al.改良硫代巴比妥荧光法测血清过氧化脂质.生物化学与生物物理进展,1996;23(2):175-178
4 陈 勤主编. 抗衰老研究实验方法.北京:中国医药科技出版社, 1996: 346-348
5 李昌吉,詹承烈,唐茂云et al.微波致角膜和视网膜损伤的实验研究. 眼外伤职业眼病,1989;11:141-143
6 Bhatt N, Peyman GA, Bahram Khoobehi B et al. Microwave induced retinal destruction with spring of sclera and choriocapillaris. Opthal Surg, 1993;24(2):125-128
7 秦 虹,赵光喜,吴惠群. 过氧化氢致大鼠晶体上皮细胞DNA损伤与修复的研究.中华眼科杂志,1996;32(6):453-456 上一页 [1] [2] |