中华眼科杂志 1999年第1期第35卷 眼表疾病
作者：张俊华 金威尔 林颖 张国安
单位：张俊华 金威尔 林颖(350004 福州，福建省人民医院眼科)；张国安（中国人民解放军第四七六医院临床免疫研究室）
关键词：翼状胬肉；肿瘤坏死因子；血小板源生长因子
【摘要】 目的 研究肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)、血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)在翼状胬肉发病机制中的作用。方法 采用放射免疫检测技术和细胞生物活性法，检测30例翼状胬肉患者组织的体外培养上清液中TNF-α和PDGF的含量。结果 翼状胬肉组的组织培养上清液中的TNF-α和PDGF含量均明显高于正常球结膜组(t=2.827，P＜0.01；t=3.011,P＜0.01)，进展期组与静止期组相比差异有显著性(t=2.374，P＜0.05；t=2.712，P＜0.05)。结论 翼状胬肉的发生、发展可能与TNF-α和PDGF的异常分泌有关。
Cytokine assays for pterygium
ZHANG Junhua*, JIN Wei'er, LIN Ying, et al.
*Department of Ophthalmology, Fujian Provincial People's Hospital, Fuzhou 350004
【Abstract】 Objective To study the roles of tumor necrosis factor (TNF-α) and platelet-derived growth factor (PDGF) in pathogenesis of pterygium.Methods Radioimmunoassay and bioactivity assay were used to measure the levels of TNF-α and PDGF in tissue culture supernatant of pterygium specimens obtained from 30 patients.Results The levels of TNF-α and PDGF in tissue culture supernatant of pterygium were significantly higher than that of normal conjunctival specimens (t=2.827, P＜0.01；t=3.011,P＜0.01), and there was a significant difference between progressive and quiescent cases (t=2.374, P＜0.05;t=2.712,P＜0.05).Conclusions The abnormal secretion of TNF-α and PDGF may be related to the pathogenesis of pterygium.
【Key words】 Pterygium Tumor necrosis factor Platelet-derived growth factor
翼状胬肉是眼科的常见病之一，但其发病机制尚不清楚。病理学研究表明，翼状胬肉的主要成分为大量增生的成纤维细胞，并由其导致相应的病变［1］。 近年来的研究表明，细胞因子在炎症反应及成纤维细胞增生方面起着重要的作用［2］。我们对翼状胬肉组织在体外培养分泌产生的肿瘤坏死因子（tumor necrosis fator,TNF-α）和血小板源生长因子（platelet-derived growth factor,PDGF）进行检测，探讨其在翼状胬肉发病机制中的作用。
资料与方法
一、对象
选择我院眼科门诊的初发型翼状胬肉患者30例（30只眼）。按病变局部有无充血、肥厚和浸润，将其分为2组：(1)进行期组19例（19只眼），男12例，女7例；年龄34～61岁，平均42.7岁。(2)静止期组11例（11只眼），男7例，女4例；年龄28～69岁，平均47.2岁。所有患者均无其他角、结膜疾患，确诊后均行翼状胬肉单纯切除术，同时剪除患眼角膜上缘上方约3 mm处的正常球结膜组织2 mm×5 mm，作为自身对照。
二、方法
1.翼状胬肉组织培养上清液的制备：翼状胬肉及正常球结膜组织取材后迅速放入含10％胎牛血清的RPMI1640(美国Gibco公司)培养液(1 ml)中， 将进行期翼状胬肉分为3组：(1)单纯培养液组。（2）加抗TNF-α抗体组：培养液中加入2 μg/ml的抗TNF-α抗体（美国Sigma公司）。（3)加抗 PDGF 抗体组：培养液中加入2 μg/ml的抗PDGF抗体（美国sigma公司），置37℃孵育24小时，研磨匀浆后离心2 500 r/min，20分钟，收集上清液，于-30℃冰箱中保存待测TNF-α和/或PDGF含量。组织蛋白含量采用改良Lowry法测定。
2.TNF-α含量的测定：采用RIA法，试剂盒购自上海长征医学有限公司。
3.PDGF活性的测定：采用细胞生物活性法见文献［3］，以1％胎牛血清促进L 929细胞增殖活性的表达为PDGF的一个活性单位(U/ml)
4.统计学处理：每份标本平行测定3个孔，求其平均值（ ±s），各组间比较采用t检验。
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