3 讨论
视网膜电图的研究已有100余年的历史,各观察指标中以b波振幅最具有代表性。然而该指标也有其一定的局限性,人们早就发现ERG b波振幅的生理与病理值重叠较大,因此使其在临床和科研中的应用受到影响。为了解决这一问题,电生理工作者进行了深入的研究。Fulton(1978)首先观察了b波振幅和刺激光强的函数关系,绘制出其“S”型回归曲线,并认为从系列光ERG可获得有关视网膜功能更丰富的信息。Arden(1983)等进一步研究表明,暗适应ERG b波振幅和刺激光强的函数关系符合Naka-Rushton等式:R/Rmax=In /(In+Kn)[1]。式中R是刺激光强为I时的b波振幅,Rmax为饱和幅值,K是半饱和常数,log K即I50,代表反应振幅为饱和振幅1/2时对应的刺激光强度[2],n是曲线斜率。以上参数中以Rmax和log K(I50)最为常用,各自代表了视网膜电活动的不同特性,为临床和科研提供了新的观察指标[3-4]。Rmax与光感受器对刺激的反应性有关,任何使视网膜反应降低的因素都将使Naka-Rushton函数曲线垂直下移。I50和视网膜敏感度有关,许多玻璃体和视网膜疾病都可以引起I50增大,使整个函数曲线向右移位,此时说明视网膜敏感性降低。人们发现,进行Naka-Rushton函数分析是总结大组数据的一种简便的方法,该方法既适用于描述分离的光感受器反应,也适用于叙述整个视网膜的功能变化[5-6]。
SD大鼠是眼科常用的实验动物,在许多眼科疾病的基础和应用研究课题中, 都将其作为首选的模型动物。但是对SD大鼠ERG b波光强—反应曲线的研究却较少报道,原因可能与理想的光强范围较难获得有关。本实验发现,SD大鼠暗适应b波的阈强度为-4.5 log cd·s·m-2,随着光强的增大,反应幅值逐渐增大,当刺激强度为-2.5 log cd·s·m-2时b波幅值趋向饱和。据文献报道,人类b波的阈强度为-3.5 log cd·s·m-2左右,饱和强度为-1.5 log cd·s·m-2左右[7]。上述差异提示,要得到适合SD大鼠的光强范围,需要对滤光片的滤过率提出更高的要求。本实验中使用的自制中性滤光片由68层白色半透明薄膜叠加而成,经检测该滤光片透光率为0.33%,即能有效降低光强度2.5 log cd·s·m-2,且不改变刺激光波长。实验前将滤光片粘贴于Ganzfeld刺激光源前,低强度刺激结束后,取下滤光片进行高强度闪光刺激,于是可以得到一组从-5.0~-2.0 log cd·s·m-2的从弱到强逐渐递增的刺激光,在该强度范围内,暗适应b波光强—振幅曲线呈“S”形,通过Naka-Rushton方法分析,发现SD大鼠Rmax为(721.2±89.5)?滋V,I50为(-3.30±0.36)log cd·s·m-2。国内高永峰等[8]对20例(30眼)正常人的Naka-Rushton等式进行了二次导数分析,获得Rmax和I50两个参数的正常值为(503.96±96.00)μV和(-2.20±0.24)log cd·s·m-2。上述差异提示,大鼠视网膜杆体系统的信号明显强于人类,敏感度也高于人类。这可能与SD大鼠属于啮齿类动物,习惯于昼伏夜出,其视网膜以视杆系统占主导地位的特点有关。
因此,记录SD大鼠杆体系统光强—反应曲线时,刺激光强度控制在-4.5~-2.5 log cd·s·m-2最为合适。
【参考文献】 [1] Arden GB, Carter RM, Hogg CR, et al. A modified ERG technique and the results obtained in X-linked retinitis pigmentosa[J]. Br J Ophthalmol,1983,67(7):419-430.
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[5] Weisinger, Armitage, Jeffrey BG, et al. Retinal sensitivity loss in third-generation n-3 PUFA-deficient rats[J]. Lipids,2002,37(8):759-765.
[6] Chung KH, Kim SH, Cho JH. The luminance-response function of the dark-adapted rabbit electroretinogram[J]. Korean J Ophthalmol,1994,8(1):1-5.
[7] Anastasi, Brai M, Lauricella M, et al. Methodological aspects of the application of the Naka-Rushton equation to clinical electroretinogram[J]. Ophthalmic Res,1993,25(3):145-156.
[8] 高永峰,郭希让,田清芬. Naka-Rushton等式二次导数分析在视网膜电图中的应用[J]. 眼科研究,1996,14(1):49-51.
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