袁进   陈家祺   陈志士  周世有 顾建军
    中山大学中山眼科中心  广州市先烈南路54号  510060

    目的：探讨阳离子聚合物介导下IL-1ra基因原位转染角膜植片，诱导移植免疫耐受的效果和机理。

    方法：构建真核表达质粒PcDNA3.1-hIL-1ra。建立Wistar-SD大鼠角膜移植排斥模型，I组为对照组，不进行干预，II组在移植前24小时，向供体角膜基质注射PcDNA3.1-hIL-1ra复合转染溶液20μl，III组在完成角膜移植重建前房时注射PcDNA3.1-hIL-1ra复合转染溶液20μl，每组数量30只。

    结果：成功构建在真核细胞内表达IL-1ra蛋白的重组质粒，显微注射转染角膜后，Western-boltting证实IL-ra蛋白在植片内表达，7d达峰值，持续21d。II、III组的植片存活时间分别为12.56±1.31d、12.21±1.14d与对照组7.65±0.88d相比，差异有显著性(P<0.05)。基因治疗组角膜植片内的细胞浸润及新生血管数量低于对照组免疫组化显示IL-1基因治疗组植片的CD4阳性细胞积数少于对照组(P<0.05)治疗组植片的RANTES显色程度弱于对照组(P<0.05) 

    结论：阳离子聚合物介导下移植前对供体角膜预转染和移植后前房注射，可将IL-1ra基因原位导入植片组织，并且获得IL-1ra蛋白的高效表达，下调免疫分子的表达，减轻免疫效应细胞的浸润，诱导免疫耐受，抑制移植排斥反应。

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