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酸性成纤维细胞生长因子及其改构体对培养大鼠视网膜神经节细胞存活与生长的影响

http://www.cnophol.com 2009-2-17 9:38:53 中华眼科在线

    张庆平  植玉婷  黄巨恩  周卫为  李校坤
    广西医科大学第一附属医院眼科,广西 南宁  530021

    摘要 目的:观察并比较不同浓度aFGF、 MaFGF对培养大鼠RGCs存活与生长的影响,并比较aFGF的神经保护活性对促有丝分裂活性的依赖程度。

    方法:  将原代培养的RGCs接种于96孔培养板:(1)Thy-1单克隆抗体鉴定、免疫阳性细胞计数、有计算轴突生长细胞百分率;(2)实验分为对照组(DMEM培养液),25ng/ml、100ng/ml、400ng/ml aFGF组(A1组、A2组、A3组)和25ng/ml、100ng/ml、400ng/ml MaFGF组(B1组、B2组、B3组),记录RGCs存活时间;(3)将培养3、5、7d的RGCs通过 MTT法测量吸光度(A)值。

    结果:(1)培养第3d,大部分存活细胞为Thy-1单克隆抗体反应阳性, 5、7d后阳性细胞数逐渐减少。培养第3d,实验各组和对照组比较,免疫阳性细胞数及有轴突生长的细胞比率均无明显差异(均P>0.05),而培养第5、7d,差异均有统计学意义(均P<0.05);(2)细胞存活期间各实验组和对照组细胞大小及形态均无明显差别,实验组比对照组细胞存活时间长3-4d;(3)培养第3、5、7d,MTT法测量吸光度(A)值:培养第3d,A、B各浓度组A值与对照组比较均无显著性差异(均P>0.05),而培养第5、 7d,差异均有统计学意义(均P<0.01);相同培养天数的A1组与A2组比较,及A2与A3组比较,A2比A1、A3较高,差异均有统计学意义(均P<0.05); A1组与A3组比较,无显著性差异(P>0.05);相同培养天数的B1组与B2组比较,及B2组与B3组比较,B2比B1、B3较高,差异均有统计学意义(均P<0.05); B1组与B3组比较,无显著性差异(P>0.05);相同浓度的aFGF各组与MaFGF各组比较,在相同培养天数时差异均无统计学意义(均P>0.05)。

    结论:(1)aFGF、 MaFGF均能促进培养大鼠RGCs的存活,并能延长RGCs的存活时间,且对RGCs的大小、形态无影响;(2)aFGF保护及促进RGCs存活的作用不依赖其有丝分裂活性。

    关键词:酸性成纤维细胞生长因子;改构型酸性成纤维细胞生长因子;视网膜神经节细胞;细胞培养                      

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(来源:中华眼科在线整理)(责编:duzhanhui)

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