王大江 黄一飞 王丽强

中国人民解放军总医院眼科 北京 100853

目的 研究同种异基因小鼠角膜移植后植片的生存时间及J2的抗角膜排斥反应的作用，从而探讨新型药物 J2对于角膜移植排斥反应的作用机制。

方法 建立以C57BL/6小鼠为供体，BALB/c小鼠为受体的角膜移植实验模型，随机分为A、B、C、D、E五组，每组20 只。A组为空白对照组，B组为自体原位移植组，C、D、E组均采用C57BL/6-BALB/c同种异体角膜移植模型,术后采用腹腔注射给药,自手术当日开始, B组、C组给予不含药物的安慰剂,D组给予CsA10mg/kg,E组给予J2 15mg/kg,每天1次,连续给药12d?观察各组植片生存指数变化，HE染色及冰冻切片CD4、CD8 免疫组化观察角膜植片病理改变。分别在术后1w、2w、3w、4w行RT-PCR检测角膜植片中RANTES、 IL-2、IL-10及IFN-γ等细胞因子的表达。

结果 同种异体移植安慰剂组角膜植片平均存活时间为18.87±4.19d，J2组发生排斥时间明显延迟为33.12±6. 80d，两组比较具有统计学差异（P＝0.000），但J2组与CsA组比较无统计学差异。组织学检查证实，术后 21天见大量细胞浸润，而J2组未见细胞浸润。免疫组化显示术后21天安慰剂组角膜植片大量CD4＋和CD8 ＋T淋巴细胞浸润，J2组植片仅有少量的CD4＋和CD8＋T淋巴细胞浸润。RT-PCR结果显示：在正常小鼠角膜未见RANTES、IFN-γ、IL-2 及IL-10基因表达。自体移植组RANTES、IL-2、IL-10和IFN-γ 基因在第1周均有少量表达，而其它3周没有显著表达；异基因移植组从第1周开始表达各种基因，第3周表达明显增强；J2组从第1周开始表达，第2、3周表达减弱，第4周表达强于前3周。

结论 J2在小鼠角膜移植模型具有抗角膜移植排斥作用，其抗排斥作用与 CsA 相近；Th1细胞在异基因小鼠角膜移植中起主要作用，而Th2细胞起次要作用；J2能够抑制T细胞活化，减少Th1细胞因子分泌的作用，但并没有诱导出免疫耐受；RANTES基因参与了异基因小鼠角膜移植排斥反应，J2可以抑制其表达。