晏颖 周和政 金中秋 陈晓
广州军区武汉总医院眼科
目的 探讨不同浓度的端粒酶编码区的反义寡核苷酸对人视网膜色素上皮细胞增生活性的影响。
方法 用常规培养法培养人视网膜色素上皮细胞后,用端粒酶编码区的反义寡核苷酸处理人视网膜色素上皮细胞后提取细胞mRNA, PCR扩增后电泳检测端粒酶mRNA表达。然后用不同浓度(0,5,10,15umol? L-1)的端粒酶编码区的反义寡核苷酸处理人视网膜色素上皮细胞后24h,使用MTT法测定视网膜色素上皮细胞增生的抑制率,使用流式细胞仪检测其对视网膜色素上皮细胞周期的影响。
结果 端粒酶反义寡核苷酸处理组凝胶分析系统软件分析结果电泳H值分别为 81,常规培养组H值为162,阴性对照组为0,阳性对照组(胃癌细胞)为255。不同浓度端粒酶编码区反义寡核苷酸处理过的视网膜色素上皮细胞的抑制率随反义寡核苷酸的浓度增高而升高,并将视网膜色素上皮细胞阻滞在G0/G1期。
结论 端粒酶编码区的反义寡核苷酸对视网膜色素上皮细胞有抑制作用且呈浓度依赖性,这一结论可能成为增生性玻璃体视网膜疾病基因治疗的一个新靶点.
|