刘庆淮

江苏省人民医院210029

目的：通过分析ARPE-19细胞中的蛋白TPR99和热休克蛋白70以及其突变体的体外结合，探讨TPR99和热休克蛋白70的相互作用，及其相互作用位点。

方法：通过RT-PCR，在ARPE-19的cDNA中扩出TPR99和Hsp70的基因，PCR检测TPR99在体内多种组织中的表达。通过酵母双杂交和GST-pull down，检测其能否相互作用，并且构建Hsp70的突变体△GPTIEEVD，△EEVD， mhsp70(EEVA) ，mhsp70(AEVD) ， PTIEEVD，通过其相互作用的情况，确定其作用位点。

结果：TPR99的多组织表达显示其在体内多种组织中表达，且在增殖性肿瘤组织中高表达。酵母双杂交和GST-PULL down结果显示，TPR99和热休克蛋白70能够相互作用，Hsp70基因突变后酵母双杂交结果显示，TPR99和Hsp70的C-末端相互作用。

结论：TPR99和Hsp70相互作用可能与促进RPE细胞增殖性疾病的发生发展有关。

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