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2结果
结果判定标准：阳性细胞为胞质呈黄色。各组各时相点分别取6张切片，每张切片在光镜×200放大条件下随机采集阳性染色最强的6个视野（即每只动物15帧测试图像），输入计算机后应用ImagePro Plus图像分析系统测定视网膜VEGF和TSP1的积分光密度，平均积分光密度值越大，染色越深，反映细胞内蛋白免疫活性（表达量）越高。正常组大鼠VEGF阳性反应在视网膜分布于内核层及节细胞层，胞质呈棕黄色，胞核未显色。模型组视网膜VEGF蛋白质的阳性表达分布于内核层及节细胞层，表达增强，胞质呈深棕黄色，内核层阳性反应细胞增多；模型组大鼠视网膜TSP1蛋白质的阳性表达较正常组显著降低，在内丛状层、外丛状层呈极微弱的阳性表达。给药组明显提高TSP1和降低WEGF的表达（表1）。表1 VEGF，TSP1在正常组和糖尿病组视网膜中表达的图像分析结果（略）
3讨论
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病的主要并发症之一。近年来的研究表明，血管内皮生长因子（VEGF）和血小板反应蛋白1(TSP1)是目前较为重要的血管刺激因子和抑制因子，它们的作用在生理性和病理性的眼底新生血管生成过程中起着关键作用[2]。牛磺酸学名称是2氨基已磺酸，占视网膜中氨基酸总量的50%。是一种人体必需的非蛋白质氨基酸,具有多种生理功能,维持细胞内外渗透压平衡,清除氧自由基。抗脂质过氧化损伤,调节细胞钙稳态,直接膜稳定作用。VEGF是促血管生长因子，通过它可以改变血管新生的一些重要过程。与经典的多肽类激素不同，VEGF主要是以旁分泌和自分泌的方式起作用[3]。TSP1可能是通过抑制内皮细胞增殖，在体外可以直接抑制兔黄体、牛肾上腺皮质、肺动脉以及人脐静脉的内皮细胞增殖，这种抑制作用可被抗TSP1的单克隆抗体所中和[4,5]。在实验中我们发现，VEGF免疫阳性反应在正常大鼠视网膜中表达较弱，且局限于视网膜内核层及节细胞层的部分细胞的胞质，而糖尿病大鼠中VEGF蛋白质的阳性表达较正常对照组大大增强，视网膜VEGF蛋白质的阳性表达明显增强，其差异具有显著性。TSP1免疫阳性反应在正常大鼠视网膜中表达较强，主要表达于内界膜、内丛状层、内核层、外丛状层。而在STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜中，TSP1蛋白质的阳性表达比正常大鼠减弱。药物组中VEGF的表达降低较糖尿病组明显，比较有差异。药物组中TSP1的表达均升高，而药物组中TSP1的表达升高较糖尿病组明显，比较有差异。在药物干预后VEGF和TSP1的表达均有变化，这更提示了二者共同参与了糖尿病视网膜病变的病程。考虑可能减轻或阻止视网膜微血管的渗漏，减少血管活性物质的合成，从而抑制血管活性物质的作用，预防血管内皮细胞收缩和间隙形成，阻止微血管基底膜增生，它能抑制血小板聚集因子的合成和释放，抑制二磷酸腺苷引发的栓形成。它们的表达失衡可能在DR的病变形成过程中起重要调控作用，二者之间的调控机制及相互作用关系目前还不清楚，本文只作了初步的探索，需更多的研究来加以完善。
【参考文献】
1魏泓.医学实验动物学.第2版.成都：四川科学技术出版社 2001:5
2郝胜利,徐延山,袁佳琴.糖尿病视网膜病变的药物治疗.国际眼科纵览 2006;30(1):5862
3陈子林,杨华胜,杨清绪,等.眼肿瘤患者组织中血管内皮生长因子、血小板反应素及微血管计数的表达.中国基层医药 2004;11(3):309310
4 Wu Z, Wang S, Sorenson CM, et al. Attenuation of retinal vascular developmentand neovascularization in transgenic mice overexpressing thrombospondin1 in thelens. Dev Dyn 2006;235(7):19081920
5 Uno K,Bhutto IA,McLeod DS, et al. Impaired expression ofthrombospondin1 ineyes with age related macular degeneration. Br J Ophthalmol 2006;90(1):4854
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